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細胞培養(cellculture)就是從機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞,然后在適宜的培養基中,讓這些細胞生長和增殖。體外細胞培養最常見的是合成培養基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的...
細胞培養的體內、外細胞的差異和分化1、差異:細胞離體后,失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響,生活在缺乏動態平衡相對穩定環境中,日久天長,易發生如下變化:分化現象減弱;形態功能趨于單一化或生存一定時...
一、實驗步驟:(1)樣品制備:對于貼壁生長細胞,yi酶消化,調整細胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養相應時間后,取出細胞爬片,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固...
WB免疫印跡法,也稱免疫轉移技術IBT(Immunoblotting),是Towbin將1975年Southern發明的Soutnernblotting技術應用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫學檢測方法...
PBS緩沖液是一種廣泛應用于生物化學實驗中的緩沖溶液,它的全稱是PhosphateBufferSaline(PB),中文通常稱為"磷酸鹽緩沖鹽溶液"或者"磷酸鹽緩沖生理li鹽水"。這種溶液之所以能夠保...
流式細胞術:即FCM。很多小伙伴在做實驗過程中會碰到很多問題,比如:無信號、熒光強度高等一系列問題,接下來就來聊聊流式細胞技術!目前,流式細胞術廣泛應用于細胞表面和細胞內分子表達特征的分析,界定不同種...
細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。然而,細胞株在體外培養的過程中會出現一些問題,比如:細胞株無法在培養皿上貼壁生長,...
實驗流程簡介一、SP三步法1)石蠟切片,常規脫蠟至水。2)0.3%或3%H2O2去離子水(無色液體)孵育10-30分鐘,以滅活內源性過氧化物酶活性。3)蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘4)候選步驟:采用抗...
先跟著遠慕一起來認識下標準溶液與基準物質標準溶液:已知準確濃度的溶液,在各種滴定分析方法中都要用到標準溶液,可根據溶質的性質、特點,按不同方法配置,配制方法有直接配置法和間接配置法。基準物質:能用來配...
對照的目的是對檢測的各個環節進行監控,因此我們按照檢測的流程對對照進行梳理。常規熒光定量PCR的流程是:樣品采集-運輸-樣品處理-核酸提取-反轉錄(RNA病毒)-擴增-結果讀取。下面看看各個環節都可以...
PCR即聚合酶鏈式反應,對于常年狂奔在實驗室的實驗人來說并不陌生。那么,對于PCR反應的核心成份,DNA聚合酶,你選對了嗎?常見的DNA聚合酶如Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primersta...
細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得...
為了能夠長期的保存大腸桿菌菌種且不破壞其結構,通常將含有足量細菌的液體培養基離心后在沉淀中加入等量40%甘油,-80℃凍存。之所以選擇甘油是因為甘油即使在超低溫凍結的情況下其體積也不會產生劇烈變化,不...
蛋白質的分離純化方法:一、根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析法:中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的...
細胞培養基滅菌的方式分為高壓滅菌和膜過濾除菌,不同的培養基由于其營養成份不同,滅菌方式也可能不同。某些培養基(如MEM)可進行高壓滅菌,這類培養基一般不含有L-谷an酰胺和碳酸qin鈉,一般是在培養基...
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