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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | 大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物價(jià)格 |
英文名稱 | Rat Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives |
貨號(hào) | EYX99200 |
大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物【Rat Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives】
大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物是從大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞提取的，大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞從正常大鼠小腸粘膜組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
堿性蛋白非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒 次 4-Benzyloxycarbonyl-piperazinone7881854-芐氧羰基-
親和硅烷 25ml 4'-Benzyloxyacetophenone5469654'-苯乙酮
1×Western半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜液 ×1L（粉末）4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate34797N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-芐脂
1×Western濕轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜液 ×1L（粉末）4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate75368N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-芐酯
×RealBlot快速轉(zhuǎn)膜液 0ml 4-Benzyl L-aspartate21773L-天冬氨酸-芐酯
HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit人狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T (1R,2R)-1-Amino-2-indanol 中文名：(1R,2R)-1-氨基-2-茚醇 分子式：C9H11NO
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T (-)-Mandelic acid benzyl ester 97415-09-3 中文名：D-(-)-扁桃酸芐酯 分子式：C15H14O3
HumanPansondisease2pan,Park2ELISAKit人帕金森氏病2Pan(Park2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T (R)-4-Methoxydalbergione 4646-86-0 中文名：(R)-4-甲氧基黃檀醌 分子式：C16H14O3
Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人胰激肽原酶(PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
無(wú)蛋白酶牛血清白蛋白 Albumin, from bovine Protease free 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí) 鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)肌醇1,4,5-三0酸受體(IP3R)功能熒光檢測(cè)試劑盒20
硬脂酸鋁 Aluminum stearate 質(zhì)量規(guī)格：AR 鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)利羅丁受體(ryanodinereceptor;RyR)功能熒光檢測(cè)試劑盒20
鉍試劑III(>99%,BR) Bismuth(III) nitrate pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 鈣鎂0酸平衡鹽(PBS)緩沖溶液500毫升
氫鈣二水(>98%,BR) Calcium phosphate, dibasic, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 鈣調(diào)蛋白結(jié)合檢測(cè)試劑盒篩選5
碳酸鈰 Cerium(III) carbonate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格：>99.9%,AR 鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌制備試劑盒1
胰凝乳蛋白酶原 A Chymotrypsinogen A 質(zhì)量規(guī)格：酶活：>1500 U/mg,BC 甘油(glycerol)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
汽巴藍(lán) Cibacron blue 3G-A 質(zhì)量規(guī)格：ACS Grade 肝素(heperin)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
DEAE葡聚糖 DEAE Dextran 質(zhì)量規(guī)格：BR 肝素(heperin)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
氟啶酮(>98%,植物激素級(jí)) Fluridone 質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級(jí) 肝素(heperin)纖維蛋白檢測(cè)法(Fibrometer)分析試劑盒50
組胺(>98%,BC) Histamine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 肝素血液抗凝液100毫升
大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物價(jià)格人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP/α1M)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid 104239-97-6 中文名： 分子式：C19H28INO3
人T細(xì)胞活化連接蛋白elisa試劑盒 人T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒、人T細(xì)胞活化連接蛋白elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Sitafloxacin 127254-12-0 中文名：西他沙星 分子式：C19H18ClF2N3O3
人P糖蛋白elisa試劑盒 人P糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人P糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人P糖蛋白試劑盒、人P糖蛋白elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Schleicheol 1 中文名： 分子式：C30H52O2
人preptinelisa試劑盒 人preptin試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人preptin試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人preptin試劑盒、人preptin elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 38006-08-5 中文名：磺胺間甲氧嘧啶鈉 分子式：C11H11N4NaO3S 度：98.0%
人Pirin蛋白(PIR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human PIR (Pirin) ELISA Kit 2-Fluoroadenosine 146-78-1 中文名： 分子式：C10H12FN5O4
運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
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