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細胞凋亡檢測法
閱讀:1721 發布時間:2016-6-21多種不同方法可用于研究程序性細胞死亡或細胞凋亡。 細胞死亡是復雜的、動態級聯反應過程,這意味著應用多參數評估細胞凋亡方法的重要性。 了解細胞死亡和存活機制是毒理分析和藥物應用中一個非常關鍵的內容。
細胞 光學顯微鏡和倒置顯微鏡
(1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。
貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。
(2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割
成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。
2 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡
一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。
常用的DNA特異性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三種染料與 DNA的結合是非嵌入式的,主要結合在DNA的A-T堿基區。紫外光激發時發射明亮的藍色熒光。