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產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大鼠食管上皮細胞提取物培養 | Rat Esophagus: Normal Esophageal Epithelial Cell Derivatives | EYX99201 |
大鼠食管上皮細胞提取物【Rat Esophagus: Normal Esophageal Epithelial Cell Derivatives】
大鼠食管上皮細胞提取物是從大鼠食管上皮細胞提取的,大鼠食管上皮細胞從正常大鼠食管組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
艱難梭菌核酸檢測試劑盒盒Stanozolol4183康力龍
腸道病毒通用核酸檢測試劑盒盒Stanolone5218雄諾龍
*大腸桿菌0157:H7核酸檢測試劑盒盒Sprengerinin C888611
乙型腦膜炎病毒核酸檢測試劑盒盒Sprengerinin A888669
恙蟲病東方體核酸檢測試劑盒盒Spongouridine837阿糖尿苷
Humanoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 16-Acetoxy-7-O-acetylhorminone 中文名: 分子式:C24H32O7 度:98.0%
Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-2/RiELISAKit 人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 (S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone 中文名:(S)-(+)-4-芐基-3-丙酰-2-惡唑烷酮 分子式:C13H15NO3 度:98.0%
Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-1/HuELISAKit 人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 1,18-Octadecanediol 中文名: 分子式:C18H38O2 度:90.0%
Humanneuophilelastase,NEELISAKit 人中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 11α-Hydroxycanrenone 192569-17-8 中文名: 分子式:C22H28O4 度:98.0% 關鍵詞:
Humanmyeloperoxidase,MPOELISAKit 人髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one 2398-63-2 中文名:17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮 分子式:C21H28O3 度:95.0%
烏藥醚內酯(標準品) Linderane 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠激肽釋放酶3(KLK3)ELISA試劑盒 ,英文名: KLK3 ELISA Kit
D(十)-無水葡萄糖(標準品) D(+)-Glucose 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠激肽釋放酶4(KLK4)ELISA試劑盒 ,英文名: KLK4 ELISA Kit
吳茱萸堿(標準品) Rutaecarpine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠激肽釋放酶5(KLK5)ELISA試劑盒 ,英文名: KLK5 ELISA Kit
吳茱萸堿 Rutaecarpine 質量規格:>98%,BR 小鼠激肽釋放酶7(KLK7)ELISA試劑盒 ,英文名: KLK7 ELISA Kit
吳茱萸堿(標準品) Evodiamine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠激肽原1(KNG1)ELISA試劑盒 ,英文名: KNG1 ELISA Kit
吳茱萸堿 Evodiamine 質量規格:≥98%(T),BR 小鼠極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒 ,英文名: VLDL ELISA Kit
五味子丙素(標準品) Schisandrin C 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒 ,英文名: VLDLR ELISA Kit
五味子醇甲(標準品) Schisandrol A 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠幾丁質酶1(CHIT1)ELISA試劑盒 ,英文名: CHIT1 ELISA Kit
五味子醇乙(標準品) Schisandrol B 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠己糖激酶(HK)ELISA檢測試劑盒MouseHexokinase,HKELISAKit 96T/48T
五味子甲素(標準品) Schizandrin A 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 ,英文名: HK ELISA Kit
大鼠食管上皮細胞提取物培養人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit Timosaponin B-II 136656-07-0 中文名:知母皂苷B-II 分子式:C45H76O19
人補體因子4(C4)酶聯吸附測定試劑盒 Human C4 (Compleme Compone 4) ELISA Kit 3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 度:98.0%
人表皮轉谷酰胺酶(TGM3)酶聯吸附測定試劑盒 Human TGM3 (ansglaminase 3, Epidermal) ELISA Kit 3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan 915095-94-2 中文名: 分子式:C17H16ClIO2
人白介素27(IL-27)酶聯吸附測定試劑盒 Human IL-27 (Ierleukin 27) ELISA Kit 3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 中文名: 分子式:C21H16FNO 度:98.0%
人α2巨球蛋白elisa試劑盒 人α2巨球蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 人α2巨球蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人α2巨球蛋白試劑盒、人α2巨球蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 5-Ami-(2-hydroxyethyl)pyrazole 中文名: 分子式:C5H9N3O
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。