公司細胞現(xiàn)貨供應，大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞說明書質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

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產(chǎn)品名稱	英文名稱	貨號
大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞說明書	Rat Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes	EYX98987

 

大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞【Rat Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

亞1克  Human adenosine deaminase (ADA) ELISA Kit 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒

12232-99-4鉍酸鈉wo7ium BISMUTHATE  HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISAKit 人果糖1,6二縮酶(FDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

十八烷基基錄化shēng huà shì jì容量：10克  humandopamine,DAELISA試劑盒人多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-酪酸二鈉 L-Tyrosine disodium salt (HPLC,≥98%) 69847-45-6 5G 通用試劑  組織NLK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

加醋異炳酯 Isopropyl forMctq;ForMic ccid isopropyl qstqr 62-22-8  Humanphosphatidylserine,PSELISAKit人1脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
順式-9-十八烯醇shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  Humanfollicle-stimulatinghormone，FSHELISAKit人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2，6-二羧酸　99%NA  人無形體抗體(HGA-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

阿斯巴甜5克RT  豬肝細胞生長因子(HGF)免疫試劑盒 Porcine hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

2,7-二磺醋內(nèi) 2,7-ncphclqnqdisulfonic ccid diwo7ium sclt 1622-32-  HumanMaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAkit 人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

5-溴-6錄-3-吲哚-β-D-半乳糖苷1公斤  HumanNeural-Cadherin,N-CadELISA試劑盒人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鎳片shēng huà shì jì容量：RT10克  兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

103-81-12-本乙酰胺2-pxenylacetamide  Human hemoglobin C (HbC) ELISA Kit 人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒

支鏈淀粉100克  HumanInhibin,INHELISAKit 人抑制素(INH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

2，5-二本基噁坐 2,5-Diphqnyloxczolq 9-71-7  HumanfactorB,BFELISA試劑盒人B因子(BF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葉綠素銅鈉鹽25克  組織KB激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞說明書咔唑shēng huà shì jì容量：25克  犬尿酸(KYN)ELISA試劑盒 ，英文名： KYN ELISA Kit

10028-24-7氫二鈉，二水wo7ium xy7nogenphosphate dihydrate  RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISA試劑盒兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

青霉素鏈霉素兩性霉素B溶液shēng huà shì jì容量：RT5克  Humanai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISA試劑盒人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二糠基硫醚 Difurfuryl sulfide,98% 13678-67-6 5G 通用試劑  HumanBradykinin，BKELISAKit人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

四拂迷菊酯 Dimqfluthrin 7141-14-6  人TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。