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人膠質瘤組織源細胞提取物培養

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更新時間:2020-12-17 16:17:30瀏覽次數:862

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產品簡介

人膠質瘤組織源細胞提取物培養在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

詳細介紹

產品名稱

人膠質瘤組織源細胞提取物培養

英文名稱

Human Cancer: Glioma Tissues Cells Derivatives

貨號

EYX99093

人膠質瘤組織源細胞提取物【Human Cancer: Glioma Tissues Cells Derivatives

人膠質瘤組織源細胞提取物是從人原代膠質瘤組織源細胞提取的,人原代膠質瘤組織源細胞從人膠質瘤組織制備。人膠質瘤組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

 實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

沙丁胺醇殘留檢測試紙條Benzoin methyl ether35242安息香甲基醚

萊克多巴胺殘留檢測試紙條Benzoin isopropyl ether66528安息香

克侖特羅殘留檢測試紙條Benzoin ethyl ether5749安息香

Anti E-tag Beads磁珠Benzoguanamine916苯代三聚胺

凝膠純化回收試劑盒0/Benzofuroxan46苯并呋咱
Mumeose K  中文名:  分子式:C25H32O15  度:93.0%  兔子腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒  

Neochlorogenic acid methyl ester  中文名:新綠原酸甲酯  分子式:C17H20O9  度:97.5%  兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒  

Ethyl 3,5-di-O-caffeoylquinate  中文名:3,5-二咖啡酰奎寧酸乙酯  分子式:C27H28O12  度:98.0%  兔子內皮抑素(ES)ELISA試劑盒  

3-O-(6'-O-Galloyl)-β-D-glucopyranosylmaltol  中文名:  分子式:C19H20O12  度:97.5%  兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒            

Falcarindiol  中文名:  分子式:C17H24O2  度:97.0%  兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISAKit
楊梅醇 HPLC98% 5mg Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

楊梅酮 HPLC98% 5mg RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒規格:96T/48T

洋椿苦素 HPLC98% 5mg RabbitVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T

洋紫蘇醇B HPLC98% 5mg RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規格:96T/48T

野甘草屬醇 HPLC98% 5mg RabbitvonWillebrandFactor,VWFELISAKit兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規格:96T/48T

野黑櫻苷 HPLC98% 20mg Rabbitα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

野黑櫻苷 HPLC98% 5mg Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規格:96T/48T

葉含乙酰癭花香茶菜素 A HPLC98% 5mg Rac1鳥苷酸酶活性分析試劑盒6

葉含乙酰癭花香茶菜素 B HPLC98% 5mg Rac2鳥苷酸酶活性分析試劑盒6

葉下珠脂素 HPLC98% 5mg RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人膠質瘤組織源細胞提取物培養Withaperuvin C  81644-34-0  中文名:  分子式:C28H38O7  度:96.5%  關鍵詞:  酸漿屬; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒  

Withanolide S  63139-16-2  中文名:醉茄內酯分子式:C28H40O8  度:98.0%  關鍵詞:  南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄內酯; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒  

Withanolide C  108030-78-0  中文名:醉茄內酯分子式:C28H39ClO7  度:97.5%  關鍵詞:  細胞毒活性; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒  

Wallicoside  88797-59-5  中文名:斷節參苷  分子式:C61H98O26  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒           

Vildagliptin  274901-16-5  中文名:維達列汀  分子式:C17H25N3O2  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit

 運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

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