大鼠腎上皮細胞提取物說明書在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

大鼠腎上皮細胞提取物【Rat Kidney：Normal Kidney Derivatives】

大鼠腎上皮細胞提取物是從大鼠原代腎上皮細胞提取的，大鼠原代腎上皮細胞從正常大鼠腎組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

表

 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

 

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

黃熱病毒單重熒光PCR檢測試劑盒481-Methyl-aminoH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35433

西尼羅病毒單重熒光PCR檢測試劑盒485-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-methylH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35434

基孔肯雅病毒單重熒光PCR檢測試劑盒481-Methyl-nitroH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35432

馬爾堡病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Bendamustine hydrochloride35435鹽酸苯達莫司汀

裂谷熱病毒單重熒光PCR檢測試劑盒481,6-Dibromopyrene2797391,6-二溴芘
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISA試劑盒人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane  83558-87-6  中文名：2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷  分子式：C15H12F6N2O2 

HumanCytochrome-C,Cyt-CELISA試劑盒人細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-(Phenylmethoxy)-naphthalene  613-62-7  中文名：2-萘酚芐基醚  分子式：C17H14O 

HumanCysticercosisaybody,CYTAbELISA試劑盒人囊蟲病抗體(CYTAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  中文名：2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式：C17H14Cl2O4 

Humancysteinylleukoienes,CysLTsELISA試劑盒人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2,2-Diphenylglycine  3060-50-2  中文名：  分子式：C14H13NO2 

HumanCystatinC,Cys-CELISA試劑盒人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  22-Dehydroclerosterol  26315-07-1  中文名：22-去氫赤桐甾醇  分子式：C29H46O
托伐普坦   Tolvaptan  質(zhì)量規(guī)格：度≥99.0%，BR,可用于細胞培養(yǎng) 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA檢測試劑盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T

磺胺噻唑  Sulfathiazole  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠髓鞘堿性蛋白抗體(MBP aibody)試劑盒 Rat myelin basic protein aibody,MBP aibody ELISA Kit

磺胺噻唑(標準品)  Sulfathiazole  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 大鼠髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)試劑盒 Rat myelin-associated glycoprotein,MAG ELISA Kit

環(huán)苯扎林鹽酸鹽  Cyclobenzaprine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA檢測試劑盒RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit 96T/48T

鹽酸美托咪定  Medetomidine HCl  質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR 大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)試劑盒 Rat iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,EM-1 ELISA Kit

京尼平甙(標準品)  Geniposide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%, 標準品 大鼠髓樣細胞觸發(fā)性受體2(EM2)試劑盒 Rat iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit

京尼平甙  Geniposide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)試劑盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit

甲睪酮; 甲基素  17-Methyltestosterone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠羧甲基賴氨酸(CML)試劑盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit

四氫生物蝶呤游離堿  Tetrahydro-L-Biopterin free base  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠胎盤生長因子(PLGF)試劑盒 Rat placea growth factor,PLGF ELISA kit

鹽酸替羅非班  Tirofiban HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,一水物，BR 大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA檢測試劑盒Ratglucoprotein130,gp130ELISAKIT 96T/48T
大鼠腎上皮細胞提取物說明書人游離睪(F-TESTO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  239463-85-5  中文名：  分子式：C26H31N3O8 

人優(yōu)球蛋白(EL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit  3,3-Dimethylacrylic acid  中文名：千里光酸  分子式：C5H8O2  度：98.0%

人隱花色素1(CRY1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit  3,3'-Sulfonyldianiline  599-61-1  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S 

人抑絲蛋白1(PFN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit                 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  中文名：  分子式：C10H7F3N2O 

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit  3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  183075-03-8  中文名：  分子式：C10H14O5