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大鼠胰腺上皮細胞提取物說明書

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更新時間:2020-12-29 16:04:12瀏覽次數:795

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產品簡介

公司細胞現貨供應,大鼠胰腺上皮細胞提取物說明書質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

詳細介紹

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優,售后齊全。

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大鼠胰腺上皮細胞提取物說明書

Rat Pancreas: Normal Pancreas Derivatives

EYX99246

 

大鼠胰腺上皮細胞提取物【Rat Pancreas: Normal Pancreas Derivatives

大鼠胰腺上皮細胞提取物是從大鼠原代胰腺上皮細胞提取的,大鼠原代胰腺上皮細胞從正常大鼠胰腺組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

細胞培養方法:

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項:

1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。

副溶血性弧菌不耐熱溶血毒素(TLH) 單重熒光PCR檢測試劑盒48Imidazo[1,2-b]pyridazine7665

副溶血性弧菌毒素調控基因(TOXR) 單重熒光PCR檢測試劑盒48Fenazox616187氨芬酸鈉

副溶血性弧菌耐熱相關溶血素(TRH) 單重熒光PCR檢測試劑盒48N-(2,6-Dimethylphenyl)-piperidinecarboxamide2726

霍亂弧菌單重熒光PCR檢測試劑盒48Fluorocytosine225

霍亂弧菌(O139)單重熒光PCR檢測試劑盒48Methyltestosterone588甲基睪酮
Human breast and kidney expressed chemokine (BRAK/CXCL14) ELISA Kit 人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒  (R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol  931116-24-4  中文名:  分子式:C10H12O2 

Human bacterial vaginosis (BV) ELISA Kit 人細菌(BV)ELISA試劑盒  2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  340702-68-3  中文名:  分子式:C50H93NO9 

Human arylsulfatase A (ASA) ELISA Kit 人芳基酯酶A(ASA)ELISA試劑盒  2-Amino-3-Formylchromone  61424-76-8  中文名:2-氨基-3-甲?;?/span>  分子式:C10H7NO3 

Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒  2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide  19284-81-2  中文名:2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚  分子式:C12H10N2O2S 

Human Aquaporin 1   英文名稱:   Human Aquaporin 1   規格:   48T/96T   英文縮寫:   AQP-1  Xanthinol nicotinate  437-74-1  中文名:煙酸占替諾  分子式:C19H26N6O6  度:98.0%  關鍵詞:
替加氟  Tegafur  質量規格:>98% 冰凍切片組織INSULIN蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

替加氟(標準品)  Tegafur  質量規格:HPLC法含量測定 冰凍切片組織IP3R受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿昔莫司,阿西莫司  Acipimox  質量規格:>98.5%,BR 冰凍切片組織JNK/SAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿昔莫司,阿西莫司(標準品)  Acipimox  質量規格:HPLC>98%,標準品 冰凍切片組織MAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿達帕林  Adapalene  質量規格:>98.5% 冰凍切片組織MYC蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿達帕林(標準品)  Adapalene  質量規格:HPLC>99%,標準品 冰凍切片組織NFKAPPABP50蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿德福韋  Adefovir  質量規格:>98% 冰凍切片組織NFKAPPABP65蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿德福韋(標準品)  Adefovir  質量規格:>98%,標準品 冰凍切片組織P16蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿爾法骨化醇  alfacalcidol  質量規格:>99% 冰凍切片組織P21蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

PS48  PS 48  質量規格:>99%,PDK1 activator 冰凍切片組織P27蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
大鼠胰腺上皮細胞提取物說明書人狀瘤病毒抗體(HPV)ELISA試劑盒     3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  1007125-14-5  中文名:  分子式:C6H12O2 

人樁蛋白elisa試劑盒   人樁蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T   人樁蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人樁蛋白試劑盒、人樁蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  154057-56-4  中文名:  分子式:C19H15BrFN  度:98.0%  關鍵詞: 

人轉運蛋白1(TNPO1)酶聯吸附測定試劑盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit                  3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  中文名:  分子式:C13H13ClN2 

人轉移因子elisa試劑盒   人轉移因子試劑盒   規格型號:96T/48T   人轉移因子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人轉移因子試劑盒、人轉移因子elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone  中文名:  分子式:C6H10O2  度:%

人轉移因子(TF)酶聯吸附測定試劑盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit  3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  中文名:  分子式:C13H13ClN2  度:98.0%

注意事項:

1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。 

 

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