PrimaCell™人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞試劑盒價格在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

產(chǎn)品名稱	PrimaCell™人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞試劑盒價格
英文名稱
貨號	EYX99529

PrimaCell™人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒大鼠游離*狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  34221-41-5刺甘草查爾酮品牌  Echinatin

小鼠組胺H4受體(HRH4)ELISA試劑盒 ，英文名： HRH4 ELISA Kit  94356-26-0曲札茋苷規(guī)格  3,5,3’,4’-trihydroxy-stilbene -3’-b-D-glucoside

山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒GoatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T  30197-14-9去氧土大黃苷  Deoxyrhapontin

犬血栓素B2(TXB2)試劑盒 Canine Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit  510-30-5刺囊酸說明書  Echinocystic acid

英文名稱Mouse15-lipoxygenaseELISAKit小鼠15-脂加氧酶(15-LO)規(guī)格：96T/48T  114902-16-8刺五加皂甙B品牌  Ciwujianoside B
76-66-4鉤藤堿品牌  Rhyncholphylline   組織1脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測試劑盒20

76475-17-7Croverin規(guī)格  Croverin   組織1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測試劑盒20

76474-56-1二氫姜黃素品牌  DihydrocurcuMin   組織1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測試劑盒20

76296-75-8重樓皂苷VII品牌  Polyphyllin VII  組織1脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量檢測試劑盒20

76296-72-5重樓皂苷II  Polyphyllin II  組織1脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測試劑盒20
Ratiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISA試劑盒大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  126105-12-2賽門苷I品牌  Siamenoside I

小鼠載脂蛋白A1(Apo A1)ELISA試劑盒 ，英文名： Apo A1 ELISA Kit  126105-11-111-0-羅漢果苷V規(guī)格  11-oxo-mogroside V

小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 96T/48T  191729-45-0通關(guān)藤苷H  Tenacissoside H

人金屬硫蛋白(MT)試劑盒 Human MT ELISA Kit  882664-74-6瓜子金皂苷己說明書  Polygalasaponin F

RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  520-12-7柳穿魚黃素品牌  Pectolinarigenin
PrimaCell™人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞試劑盒價格174721-08-5人參皂苷Rh4  Ginsenoside Rh4  英文名稱RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)規(guī)格：96T/48T

17429-69-5黃芪總皂苷  Astragaloside   英文名稱RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)規(guī)格：96T/48T

17406-45-0番茄堿  Tomatine   英文名稱RatLBPELISAKit大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)規(guī)格：96T/48T

17388-39-5獐牙菜苦苷品牌  Swertiamarin  英文名稱RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)規(guī)格：96T/48T

173429-83-9補骨脂香豆素A規(guī)格  Ficusin A    英文名稱RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)規(guī)格：96T/48T

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。