詳細介紹
產品描述:
細胞名稱 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養
形態特性上皮樣
生長特性貼壁生長
特征特性
培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法1:2~1:3傳代。
傳代情況C3
凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養法(-)
STRAmelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13,14;D18S51:16,17,18,19;D19S433:17,18,OL;D21S11:28,30.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:10,11;D8S1179:12,14;FGA:22,23,24;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,17,18,19,20,21;
同工酶
染色體
冷凍保存細胞之方法:
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
Pepsin*小鼠胃蛋白酶規格48T/96T
小鼠胃腸癌標志物CA199ELISAKit,48T/96T*小鼠胃腸癌標志物CA199ELISAKit,48T/96T規格48T/96T
VK1*小鼠維生素K1規格48T/96T
VE*小鼠維生素E規格48T/96T
VD3*小鼠維生素D3規格48T/96T
VD2*小鼠維生素D2規格48T/96T
VD*小鼠維生素D規格48T/96T
VC*小鼠維生素C規格48T/96T
VB6*小鼠維生素B6規格48T/96T
VB12*小鼠維生素B12規格48T/96T
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養CC趨化因子受體3抗原CCR-3(CCchemokinereceptor3)CC趨化因子受體3抗原0.5mgCCR-3(CCchemokinereceptor3
細胞表面趨化因子受體4抗原CCR-4(C-Cchemokinereceptor4)細胞表面趨化因子受體4抗原0.5mgCCR-4(C-Cchemokinereceptor4
CCR-6/CD196peptide細胞表面趨化因子受體6抗原CCR-6/CD196peptide細胞表面趨化因子受體6抗原0.5mgCCR-6/CD196peptide細胞表面趨化因子受體6抗原
CCR-7(CCchemokinereceptor7)CC趨化因子受體7(多肽)0.5mgCCR-7(CCchemokinereceptor7
CD10抗原CD10/CALLA(NeutralEndopeptidase)CD10抗原0.5mgCD10/CALLA(NeutralEndopeptidase
CD105/EndoglinCD105蛋白CD105/EndoglinCD105蛋白0.2mgCD105/EndoglinCD105蛋白
CD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉化生長因子β受體抗原CD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉化生長因子β受體抗原0.5mgCD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉化生長因子β受體抗原
CD117/c-kit/SCFR干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原(抗原)0.5mgCD117/c-kit/SCFR干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原(抗原
注意事項:
?1.一般客戶拿到293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
(4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
(5)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發;
(7)視具體情況而定。