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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 18:22:34瀏覽次數(shù):182次
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人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
21200 龍膽苦苷 gentiopicrin HPLC≥98% 20mg/支
21201 膽酸 Cholic acid HPLC≥98% 20mg/支
21202 * Hyodeoxycholic acid UV≥98% 20mg/支
21203 去氧膽酸 Deoxycholic acid HPLC≥98% 20mg/支
21204 芝麻素 Sesamin HPLC≥98% 20mg/支
21205 芝麻林素 Sesamolin HPLC≥98% 20mg/支
21206 多巴 Levodopa UV≥99% 20mg/支
21207 * Paclitaxel HPLC≥98% 20mg/支
21208 梔子苷(京尼平苷) Geniposide HPLC≥98% 20mg/支
21209 大麥芽堿 Hordenine HPLC≥95% 20mg/支
21210 厚樸酚 Magnolol HPLC≥98% 20mg/支
21211 和厚樸酚 Honokiol HPLC≥98% 20mg/支
21212 番瀉苷A Sennoside A HPLC≥98% 20mg/支
21213 番瀉苷B Sennoside B HPLC≥99% 20mg/支
21214 番瀉苷C Sennoside C HPLC≥98% 20mg/支
21215 番瀉苷D Sennoside D HPLC≥98% 20mg/支
21216 紫草素 Shikonin HPLC≥99% 20mg/支
21217 川楝素 Toosendanin HPLC≥98% 10mg/支
21218 川芎嗪 2,3,5,6-Tetramethylpyrazine HPLC≥98% 20mg/支
21219 * Ligustrazine Hydrochloride HPLC≥98% 20mg/支
21220 異鼠李素 Isorhamnetin HPLC≥98% 20mg/支
21221 D-(+)-木糖 D-(+)-Xylose HPLC≥99% 20mg/支
21222 積雪草苷 Asiaticoside HPLC≥90% 20mg/支
21223 羥基積雪草苷 Madecassoside HPLC≥98% 20mg/支
21224 積雪草酸 Asiatic acid HPLC≥98% 20mg/支
21225 羥基積雪草酸 Madecassic acid HPLC≥98% 20mg/支
21226 β-谷甾醇 β-Sitosterol HPLC≥98% 20mg/支
21227 *(辣椒素) Capsaicin HPLC≥98% 20mg/支
21228 二氫* Dihydrocapsaicin HPLC≥98% 20mg/支
21229 胡椒堿 Piperine HPLC≥99% 20mg/支
21230 鳶尾黃素 Tectorigenin HPLC≥98% 20mg/支
21231 鳶尾苷(射干苷) Tectoridin HPLC≥98% 20mg/支
21232 五味子甲素 Schizandrin A HPLC≥98% 20mg/支
21233 五味子乙素 Schizandrin B HPLC≥98% 20mg/支
21234 五味子醇甲 Schisandrin HPLC≥98% 20mg/支
21235 五味子酯乙 Schizandrol B HPLC≥98% 20mg/支
21236 五味子酯甲 Schizandrol A HPLC≥98% 20mg/支
21237 五味子醇乙 Schisandrol B HPLC≥98% 20mg/支
21238 * Nicotinamide HPLC≥99.5% 50mg/支
21239 西紅花苷(藏紅花素,番紅花苷) Crocin Standard(標準) 20mg/支
21240 西紅花苷I Crocin I HPLC≥97% 20mg/支
21241 西紅花苷II Crocin II HPLC≥98% 20mg/支
21242 桑色素 Morin HPLC≥98% 20mg/支
21243 D-(-)-奎寧酸 D-(?)-Quinic acid ≥98% 20mg/支
21244 梓醇 catalpol HPLC≥98% 20mg/支
21245 根皮苷 phloridzin HPLC≥99% 20mg/支
21246 蛻皮激素 Ecdysterone HPLC≥98% 20mg/支
21247 6-姜酚(姜辣素) 6-gingerol HPLC≥98% 20mg/支
21248 蒿本內(nèi)酯人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 Z-Ligustilide HPLC≥90% 20mg/支
21249 脫氧野尻霉素(DNJ) 1-Deoxynojirimycin HPLC≥98% 20mg/支
21250 劍麻皂苷元 sisalagenin HPLC≥98% 20mg/支
21251 檸檬苦素 Limonin HPLC≥98% 20mg/支
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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