產品屬性：

商品介紹：

測定意義

PEPCK（EC 4.1.1.32）廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，催化草酰乙酸轉化為磷酸烯醇式丙酮酸，是調節糖異生途徑的關鍵酶。

測定原理：

PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性。

需自備的儀器和用品：

分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
產品內容：

公司產品僅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存

試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。

NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。

NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。

操作步驟：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

2、組織中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

下列是公司正在熱銷的產品：

肝吸蟲狀腺原liver fluke

交替氧化甲狀腺aldehyde oxidase

AFB1白蛋白游離甲狀腺AFB1 albumin

c-fos游離狀腺原c-fos

糖皮質受體β新生甲狀腺glucocorticoid receptor-β

核轉錄因子p50胰島NF-kappa-B p50

葡聚糖水合二激C肽glucan-water dikinase

V型ATP絨毛膜促性腺V-ATPases

酪絨毛膜促性腺βTyrosinase

胰凝乳蛋白促黃體Chymotrypsin

磷化MAP激相互作用絲,蘇激松龍phosphorylated MAP kinase interacting serine,threonine kinas

新蝶呤瘦Neopterin

沙門氏菌抗體苗條受體Salmonella antigen antibody

腫廇蛋白P63生長Tumor Protein P63

細胞色P450 11A;B紅生成Cytochrome P450 11A;B
PEPCK磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶微量法硝鉻 99.95% metals basis異辛烷中5種有機氯農藥混和溶液 基體:異辛烷Lp- Alpha(Mouse lipoprotein Alpha) ELISA Kit  小鼠脂蛋白α

硫鈷，七水 AR，99.5%鹽呋喃它酮  分析標準品，99.8%Big ET(Mouse Big Endothelin) ELISA Kit  小鼠大內皮

氯化鈷 ACS reagent, 98% 胭脂紅標準溶液0.50mg/ml,溶劑：水F VIII -Ag(Mouse coagulation factor VIII related antigen) ELISA Kit  小鼠Ⅷ相關抗原

硝鎘,四水 99.99% metals basis金標準溶液100.0μg/g，基體:0.5mol/l鹽F IX (Mouse Fcoagulation factor IX ) ELISA Kit  小鼠Ⅸ

硝鎘,四水 99.999% metals basis釓標準溶液 1000µg/mL，基體：10%HClF X (Mouse coagulation factor X ) ELISA Kit  小鼠Ⅹ

氧化鉻 99.95% metals basis三標準溶液0.001g/ml,溶劑:水vWF(Mouse von Willebrand Factor) ELISA Kit  小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子

乙鎘 二水合物 99.99% metals basis三標準溶液0.0001g/ml,溶劑:水Pro-ANP(Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit  小鼠前心鈉肽

鈣黃綠 超純級人參皂苷Rg1純度標準物質 99.6×10-2NT-proBNP(Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide) ELISA Kit  小鼠N端前腦鈉

注意事項：

1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。

2、反應過程要注意避光。

3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應當乘以稀釋倍數。