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產品介紹
本產品僅供科研實驗，不得用于醫療或食用
| 免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Westernblotting)，它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。 凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA 結合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。這一技術zui初用于研究DNA 結合蛋白，目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA 序列的相互作用。
WB實驗代測，Western Blot技術服務，免疫印跡代測 WB實驗代測，Western Blot技術服務，免疫印跡代測
2)選擇合適的蛋白酶抑制劑，避免蛋白降解，從而保證檢測的準確性！ 2 、蛋白定量 常用的蛋白定量方法：Bradford assay, Lowry assay 或BCA assay。定量后，可根據情況將標本保存在-20°C /-80°C備用，進行免疫沉淀（IP）或者直接進行電泳分離蛋白 3 、電泳分離蛋白質 根據待測蛋白狀態確定電泳條件：
根據不同的檢測目的和待測蛋白的特性,選擇合適的膜類型。常用的轉移膜類型有:PVDF膜、硝酸纖維素膜（NC膜）和尼龍膜，其中PVDF和NC膜的使用頻率zui高。各種膜的技術參數及比較如下：
去掉膜上多余的非特異性結合位點，降低背景。常用的封閉溶液有：含BSA或者脫脂奶粉的TBST或TBS 6 、一抗孵育 一抗的選擇成功與否，是整個WB實驗成功的關鍵：選擇一抗有以下幾個注意點： 選擇適合檢測標本種屬的一抗（說明書有驗證） 選擇適用于WB實驗方法的一抗（說明書有驗證） 選擇單克隆抗體或者經過親和純化的多克隆抗體 一抗的保存和使用： 根據說明書的要求條件進行抗體的保存；一般需要將抗體分裝后放入-20度保存，避免反復凍融。 抗體的工作液現配現用，在4度保存不要超過2周 根據說明書推薦濃度使用TBST稀釋一抗。由于實驗室條件和檢測方法等的差異，說明書推薦的稀釋比例只作參考，需要在說明書推薦的濃度周邊進行多個濃度梯度的實驗檢測，然后選擇信噪比的抗體濃度進行實驗。如果說明書沒有推薦濃度，可進行多個稀釋比例進行摸索*稀釋度（1:100-1:3000）。 孵育條件：推薦4°C孵育過夜（一般大于18個小時），根據抗體親和力不同孵育時間有所區別 內參的選擇和使用：WB 過程監測以及目的蛋白定量的標準！ WB常用內參及其技術參數：
7 、二抗孵育 根據說明書推薦濃度使用TBST稀釋一抗。如果說明書沒有推薦濃度，可進行多個稀釋比例進行摸索*稀釋度（1:1000-1:20000）。孵育條件一般為室溫1-2小時 8 、底物孵育 選擇顯色或者化學發光底物。一般傾向于化學發光，靈敏度高且背景低，節省抗體用量 9 、結果分析和檢測 凝膠成像系統檢測或者暗室曝光到膠片 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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