小鼠精母細胞
平臺編號:zl-057171
規格:1×10?cells/T25培養瓶
細胞信息:GC-2spd(ts)
產品信息
名稱GC-2spd(ts)(小鼠精母細胞)(種屬鑒定正確)
別稱GC-2
種屬小鼠
年齡(性別)6周齡
組織來源精母細胞;SV40大T抗原轉染
生長特性貼壁細胞
細胞形態上皮細胞樣
背景描述The cells have lost their differentiation potential,and are currently arrested at a premeiotic stage.
生物安全等級2
生長培養基DMEM+10%FBS+1%P/S
推薦傳代比例1:4-1:6
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液:55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
應用領域This cell line may be useful for the study of spermatogenesis.
保藏機構ATCC;CRL-2196 BCRC;60313
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細胞處理
1)凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完,全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完,全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完,全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養。
該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞,傳代可以參考以下方法:
1.收集:將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。
2.加入0.25%(w/v)胰,蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3.將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完,全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。