土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）檢測試劑盒說明書，正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化， 其水解產物是高等植物的氮源之一。S-ALPT 在堿性環境下催化蛋白質水解，與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。

測定原理：

堿性條件下，S-ALPT 可將酪蛋白水解產生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍；在 680nm 有特征吸收峰。

土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）檢測試劑盒自備實驗用品及儀器：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、微量石英比色皿/96 孔板、雙蒸水

試劑組成和配置：

試劑一：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 5ml 蒸餾水充分溶解；用不完的試劑 4℃保存； 試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 50μ L 試劑七使粉劑潤濕，然后加入 10ml 試

劑一，轉入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；用不完的試劑 4℃保存；

試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 20ml 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑 4℃ 保存；

試劑五：液體 3mL×1 瓶，4℃保存；

試劑六：液體 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 標準酪氨酸溶液，4℃保存； 試劑七：液體 1.5mL×1 支，4℃保存；

樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。

測定操作：

1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 680nm，蒸餾水調零。

2、試劑二、三和四 40℃水浴 10min。

3、樣本測定：

土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）檢測試劑盒混勻后，40℃水浴 30min，振蕩 5-6 次，使土樣與反應液充分接觸

混勻，8000g 25℃離心 10min，取上清液，在 EP 管或 96 孔板中加入下列試劑