冰凍切片組織三磷酸腺苷酶活性染色試劑盒

　　產品說明書

　　主要用途

　　冰凍切片組織三磷酸腺苷酶(ATP酶)活性染色試劑是一種旨在使用鈣激活技術，在堿性條件下，由三磷酸腺苷酶催化水解產生的磷酸與鈣離子結合，經過氯化鈷的替換，zui后在硫化銨存在的情況下，呈現組織樣本中酶活性部位的棕黑色沉淀現象的而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心改良、成功實驗證明的。主要適用于動物組織冰凍切片的酶活性檢測。也可用于人體肌肉組織纖維的分型鑒定。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，靈敏牢固，顯色清晰。

　　三磷酸腺苷酶或ATP酶(adenosinetriphosphatase;ATPase)可催化ATP水解生成ADP及無機磷的反應，這一反應放出大量能量，用于運送離子進出細胞，同時供給生物體進行需能生命過程。它存在于生物細胞的多個部位，比如細胞質膜上和葉綠體類囊體膜上等，對整個生命的維持有著重要的作用。膜結合ATP酶存在多種形式：鈉鉀ATP酶、胞膜鈣泵ATP酶(plasma membrane calcium ATPase;PMCA)或肌質網/內質網鈣泵ATP酶(sarcoplasmic or endoplasmic reticulum calcium ATPases;SERCA)、氫鉀ATP酶(hydrogen/potassium ATPase)或胃質子泵(gastric proton pump)等。

　　產品內容

　　堿性液(Reagent A) 毫升

　　反應液(Reagent B) 毫升

　　激活液(Reagent C) 毫升

　　置換液(Reagent D) 毫升

　　清理液(Reagent E) 毫升

　　顯色液(Reagent F) 毫升

　　產品說明書 1份

　　保存方式

　　保存反應液(Reagent B)在-20℃冰箱里，避免反復凍融，避免光照;其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月

　　用戶自備

　　培養箱：用于反應孵育

　　小型染色缸：用于染色清洗操作

　　光學顯微鏡：用于染色后觀察分析1或

　　酶法冰凍切片人體肌肉組織分型染色試劑盒

　　酶法冰凍切片動物肌肉組織分型染色試劑盒

　　實驗步驟

　　實驗開始前，將試劑盒里的反應液(Reagent B)從-20℃的冰箱里取出，放進冰槽里融化，避免光照。然后進行下列操作： 一、 樣本激活處理

　　1.取出待測的 5 至 10 微米厚的冰凍組織切片(注意：參見注意事項 3 和 4)

　　2.小心加上 xx 微升 堿性液(Reagent A)在切片上，鋪滿整個樣品表面

　　3.小心移去 堿性液(Reagent A)

　　4.小心加上 xx 微升 反應液(Reagent B)，鋪滿整個樣品表面

　　5.放進 37℃培養箱里，孵育 30 分鐘

　　6.小心移去 反應液(Reagent B)

　　7.小心加上 xx 微升 激活液(Reagent C)，鋪滿整個樣品表面

　　8.室溫下孵育 2 分鐘

　　9.小心移去激活液(Reagent C)

　　10.重復實驗步驟 7 至 9 二次

　　二、樣本染色處理

　　1. 小心加上xx微升置換液(Reagent D)，鋪滿整個樣品表面

　　2. 室溫下孵育2分鐘

　　3. 小心移去置換液(Reagent D)

　　4. 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育1分鐘

　　5. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)

　　6. 小心加上xx微升顯色液(Reagent F)，鋪滿整個樣品表面

　　7. 室溫下孵育30至60秒;或直至可見棕黑色

　　8. 小心移去顯色液(Reagent F)

　　9. 室溫下，小心將切片置入xx毫升清理液(Reagent E)中孵育2分鐘

　　10.小心移去切片上的清理液(Reagent E)

　　三、 (選擇步驟)樣本復染處理

　　1. 樣本復染處理(蘇木素)

　　2. 放上蓋玻片或封片

　　3. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察：酶活性陽性部位呈現深淺不一的棕黑色(如果復染，則細胞核為藍色)

　　注意事項

　　1. 本產品為50次操作

　　2. 操作時，須帶手套

　　3. 建議組織快速冷凍，避免切片冰晶形成

　　4. 冰凍切片不可固定處理

　　5. 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面

　　6. 本產品可以用于鑒定人體肌肉纖維I型和II型：淺染為I型;深染為II型。如果需要進一步鑒定亞型或動物肌肉纖維分型，建議使用

　　7. 組織細胞染色注意不要過度

　　8. 可以使用有機溶劑(乙醇、二甲苯等)脫水、澄清處理后封片

　　9. 組織細胞染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察

　　10.本公司提供系列組織細胞酶活性染色試劑產品

　　質量標準

　　1. 本產品經鑒定性能穩定

　　2. 本產品經鑒定顯色清晰

　　染色試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒