購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的JM110 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。
JM110 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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JM110 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620]
CL-0380MDA-MB-157(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EPHA4 Others Human 人 EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系 人腎癌Wilms,G-401細(xì)胞 NCI-H1869 [H1869](人肺癌細(xì)胞)
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1
ESAM Others Human 人 ESAM 人細(xì)胞
人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1
ERBB2 Others Mouse 小鼠 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CoC1(懸浮) 卵巢癌
MRC-5-EGFP+puro人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5-EGFP+puro in human embryo lung fibroblasts MEM+10%Hyclone滅活血清+2ug/ml puromycin
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人角膜上皮細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 ) 293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系 Human
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620]
CL-0380MDA-MB-157(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EPHA4 Others Human 人 EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系 人腎癌Wilms,G-401細(xì)胞 NCI-H1869 [H1869](人肺癌細(xì)胞)
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1
ESAM Others Human 人 ESAM 人細(xì)胞
Cyclopentaneoxime環(huán)戊酮肟100毫克CP,98%
56375-79-2三丁基甲基錄化銨metxyl tributyl ammonium chloride
Hexadecylpyridiniumbromide十六烷基基溴500克AR
4-(二乙基) 4-(Diethylamino)salicylaldehyde,98% 17754-90-4 5G 通用試劑
硫代基脲/基硫脲/硫脲/硫代基硫脲/N-基硫脲/基碳硫酰胺/TSC AR,98%, 25克 國產(chǎn)
蘋果酸,英文名或英文縮寫:DL-Malic acid,級別:CP,99%,規(guī)格:1毫克
13683-93-7N-BOC-3-基酚 97%N-BOC-3-AMINOpxenOL 97
SP6核糖核酸聚合酶,英文名或英文縮寫:SP6 RNA Polymerase,級別:BR,150u/mg,芬末,微生物,規(guī)格:500毫升
三乙基硅烷 Chlorotriethylsilane ,≥98.0% 994-30-9 25ML 多肽試劑
TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN*抑制劑,大豆蛋白組學(xué)級1G9035-81-8Frozen
JM110 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格茜素-β-半乳糖苷瓊脂1米
83881-52-1*Cetirizine xy7nochloride
2-Fluoro-5-metxylpyridine-3-boronic acid pinacol ester 1073371-96-6
3-巰基丙酸甲酯 Methyl 3-mercaptopropionate,≥98% 2935-90-2 10G 通用試劑
透析袋3500/Dialysis tubing 3500 φ27(扁寬34mm),截留分子量3500 1米 USA
JM110 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格注意事項:
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。