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ATCC細(xì)胞
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血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)

時間:2013/7/8閱讀:1823
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 血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)

 
內(nèi)皮細(xì)胞易于從大血管分離培養(yǎng)成單層細(xì)胞,對于研究內(nèi)皮細(xì)胞再生、腫瘤促血管生長因子(TAF)等有很大價值。 
 血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)研究人內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)以人臍帶靜脈灌流消化法zui為簡便,其法如下: 
1、產(chǎn)后新鮮臍帶,無菌剪取10—15厘米長一段,如不能立即培養(yǎng),可于12小時內(nèi)保存于4℃。 
2、用三通注射器吸取溫PBS液注入臍靜脈中洗去殘血,在入口處用線繩扎緊,以防液體返流。 
3、用血管鉗夾緊臍帶一端,從另一端向臍靜脈中徐徐注入終濃度為0.1%的粗制膠原酶,充滿血管,消化3—10分鐘;注入口用線繩扎,以防液體返流。 
 血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)4、吸出含有內(nèi)皮細(xì)胞的消化液,于離心管中,注入溫PBS輕輕反復(fù)沖洗后,一并注入離心管中(此步驟可重復(fù))。5、離心去上清,加入RPMI1640培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液,接種入培養(yǎng)器皿中,置溫箱培養(yǎng)。兩至三天可見細(xì)胞長成單層。

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