免費(fèi)代測人腦鈉肽ELISA檢測試劑盒說明書

2014年07月31日 09:58上海撫生實(shí)業(yè)有限公司點(diǎn)擊量：323

試驗(yàn)原理：

ANP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知ANP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將ANP和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ANP的濃度呈比例關(guān)系。

試劑盒內(nèi)容及其配制：

試劑盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶標(biāo)板

1塊板（96T）

半塊（48T）

塑料膜板蓋

1塊

半塊

標(biāo)準(zhǔn)品：400pg/ml

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

空白對照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

*標(biāo)記的抗ANP抗體

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

親和鏈酶素-HRP

1瓶（12ml）

1瓶（6.0ml）

洗滌緩沖液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

終止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

自備材料：

蒸餾水。

加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

樣品收集、處理及保存方法：

血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作注意事項(xiàng)：

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

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