
2025年03月25日 10:21西安齊岳生物科技有限公司點擊量:22
CY3-Isothiocyanate,CY3-ITC,CY3-異硫氰酸酯制備方法
CY3-Isothiocyanate (CY3-ITC) 是一種具有熒光特性的染料衍生物,常用于生物標記和分子探針。它的制備通常涉及CY3染料和異硫氰酸酯基團(-NCS)的結合。異硫氰酸酯基團可以與氨基(例如蛋白質上的氨基)反應,形成穩定的共價鍵,從而實現對目標分子的標記。
制備步驟
1. 準備反應物
CY3染料:選擇合適的CY3染料衍生物(如CY3-NHS酯或CY3-氨基)作為起始物料。常用的是CY3-NHS酯(NHS酯化合物),因為它可以與親核基團反應。
異硫氰酸酯試劑:選擇異硫氰酸酯(R-NCS)試劑,通常需要與相應的溶劑(如無水二甲基亞砜(DMSO)或氯仿)混合溶解。常用的異硫氰酸酯化學試劑為苯基異硫氰酸酯(Phenyl Isothiocyanate, PITC)或烷基異硫氰酸酯。
2. 反應步驟
溶解CY3染料:將CY3染料(例如CY3-NHS酯)溶解在合適的溶劑中(如二甲基亞砜(DMSO)或無水乙腈)。使用適當濃度(通常在1-10 mM范圍內)以確保反應的充分性。
溶解異硫氰酸酯:將異硫氰酸酯(例如苯基異硫氰酸酯,PITC)溶解在適當的溶劑中(如DMSO、氯仿或無水乙醇)。異硫氰酸酯的濃度應為2-3倍CY3染料的濃度。
反應條件:在冷藏條件下(通常在0-4°C之間),將異硫氰酸酯加入CY3染料溶液中。反應時間可以根據需要進行調整,通常為2-4小時。此反應時間確保異硫氰酸酯基團與CY3染料發生反應。
反應監控:使用紫外-可見光光譜(UV-Vis)或高效液相色譜(HPLC)監控反應進程,以確保異硫氰酸酯與CY3的反應完成。可以觀察CY3染料的吸收峰的變化來確認反應是否成功。
3. 反應后處理
去除溶劑和未反應物:反應完成后,可以使用旋轉蒸發(rotary evaporator)或透析去除反應體系中的溶劑和未反應的試劑。對于水溶性產物,透析是一種常見的清除方法;對于有機溶劑溶解的產物,可以通過反相色譜或凝膠滲透色譜進行純化。
沉淀和干燥:根據需要,可以將反應產物在低溫下沉淀出來,然后用適當的溶劑(如乙醇或乙酸乙酯)清洗,去除未反應的物質。干燥產物以獲得最終的CY3-Isothiocyanate。
純化:可以通過反相高效液相色譜(HPLC)進一步純化反應產物,確保獲得高純度的CY3-異硫氰酸酯。純化時可以選擇適當的流動相和梯度條件,以分離純化產物。
產品名稱:CY3-Isothiocyanate,CY3-ITC,CY3-異硫氰酸酯
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規有機溶劑。
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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僅供科研,不能用于人體實驗AXC.2025.03.04
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