一、色譜圖中未出峰
解決方法：系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解；泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確；檢測(cè)器設(shè)置不正確；針對(duì)以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可。
二、一個(gè)峰或幾個(gè)峰是負(fù)峰。
解決方法：流動(dòng)相吸收本底高；進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)入空氣；樣品組分的吸收低于流動(dòng)相。
三、所有峰均為負(fù)峰。
解決方法：信號(hào)電纜接反或檢測(cè)器輸出極性設(shè)置顛倒；光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡。
四、所有峰均為寬峰。
解決方法：系統(tǒng)未達(dá)到平衡；溶解樣品的溶劑極性比流動(dòng)相差很多；色譜柱尺寸及類型選擇不正確；色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低；溫度變化造成的影響。
五、所出峰比預(yù)想的小
解決方法：樣品黏度過(guò)大；進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差；檢測(cè)器設(shè)置不正確．定量環(huán)體積不正確；檢測(cè)池污染；檢測(cè)器燈出現(xiàn)問(wèn)題。
六、保留時(shí)間變化
可能的原因 : 解決方法
1.柱溫變化 : 柱恒溫
2.等度與梯度間未能充分平衡 : 至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱
3.緩沖液容量不夠 : 用>25mmol/L的緩沖液
4.柱污染 : 每天沖洗柱
5.柱內(nèi)條件變化 : 穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相
6.柱快達(dá)到壽命 : 采用保護(hù)柱
七、保留時(shí)間縮短
可能的原因 : 解決方法
1.流速增加 : 檢查泵,重新設(shè)定流速
2.樣品超載 : 降低樣品量
3.鍵合相流失 : 流動(dòng)相PH值保持在3-7.5檢查柱的方向
4.流動(dòng)相組成變化 : 防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀
5.溫度增加 : 柱恒溫
八、保留時(shí)間延長(zhǎng)
可能的原因 : 解決方法
1.流速下降 : 管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡
2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化 : 用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱
3.鍵合相流失 : 流動(dòng)相PH值保持在3-7.5檢查柱的方向
4.流動(dòng)相組成變化 : 防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀
5.溫度降低 : 柱恒溫
九、肩峰
可能的原因 : 解決方法
1.樣品體積過(guò)大 : 用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于峰的15%
2.樣品溶劑過(guò)強(qiáng) : 采用較弱的樣品溶劑
3.柱塌陷或形成短路通道 : 更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件
4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效 : 更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過(guò)濾器,過(guò)濾樣品
5.進(jìn)樣器損壞 : 更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子
十、鬼峰
可能的原因 : 解決方法
1.進(jìn)樣閥殘余峰 : 每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗
2.樣品中未知物 : 處理樣品
3.柱未平衡 : 重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑 (尤其是離子對(duì)色譜)
4.三(TFA)氧化(肽譜) : 每天新配,用抗氧化劑
5.水污染(反相) : 通過(guò)變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量，用HPLC級(jí)的水
十一、基線噪聲
可能的原因 : 解決方法
1.氣泡(尖銳峰) : 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓
2.污染(隨機(jī)噪聲) : 清洗柱,凈化樣品,用HPLC級(jí)試劑
3.檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲 : 更換氘燈
4.電干擾(偶然噪聲) : 采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來(lái)源(如水浴等)
5.檢測(cè)器中有氣泡 : 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓
十二、峰拖尾
可能的原因 : 解決方法
1.柱超載 : 降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相
2.峰干擾 : 清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相，使用更長(zhǎng)的色譜柱
3.硅羥基作用 加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH值,鈍化樣品
4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效 : 更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過(guò)濾器,過(guò)濾樣品
5.柱塌陷或形成短路通道 : 更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件
6.死體積或柱外體積過(guò)大 : 連接點(diǎn)降至,對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管
7.柱效下降 : 用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱，活化色譜柱
十三、峰展寬
可能的原因 : 解決方法
1.進(jìn)樣體積過(guò)大 : 用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于峰的15%
2.在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展 : 進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散
3.數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢 : 設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)
4.檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過(guò)大 : 設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣峰半寬的10%
5.流動(dòng)相粘度過(guò)高 : 增加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相
6.檢測(cè)池體積過(guò)大 : 用小體積池,卸下熱交換器
7.保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng) : 等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫
8.柱外體積過(guò)大 : 將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至最小
9.樣品過(guò)載 : 進(jìn)小濃度小體積樣品
十四、峰分叉
可能的原因：解決方法
1.保護(hù)柱或分析柱污染：取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析。如果必要更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞，拆下來(lái)清洗。如果問(wèn)題仍然存在，可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染，運(yùn)用適當(dāng)?shù)脑偕胧Ｈ绻麊?wèn)題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。
2. 樣品溶劑不溶于流動(dòng)相：改變樣品溶劑。如果可能采取流動(dòng)相作為樣品溶劑。
十五、基線漂移
可能的原因:解決方法
1、柱溫波動(dòng)。（即使是很小的溫度變化都會(huì)引起基線的波動(dòng)。通常影響示差檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、較低靈敏度的紫外檢測(cè)器或其它光電類檢測(cè)器）：控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，在檢測(cè)器之前使用熱交換器