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多克隆抗體及單克隆抗體的制備

2025年02月24日 16:26上海撫生實業(yè)有限公司點擊量:16

1、多克隆抗體的制備:

①免疫方法:對多克隆抗體,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮內免疫法、淋巴結免疫法和混合法等。一般來說,皮下或肌肉免疫法產(chǎn)生的抗體比較多;皮內免疫法所需的抗原量少,在抗原寶貴時特別適用,但與之相對的,它產(chǎn)生的抗體量也不多。混合免疫法的優(yōu)點是抗原用量小,產(chǎn)生抗體速度快。

②多克隆抗體的制備:將抗原免疫動物(常用的動物為兔、羊、狗等),分離出抗血清并純化抗體。多克隆抗體的均一性較差,其特異性相對較低,因此,多克隆抗體在農(nóng)藥殘留速測技術中的應用受到一定的限制。但近年來有學者恰恰利用了多抗的交叉反應高的特點,通過制備出具有某類(或某幾種)農(nóng)藥的“共性結構”的半抗原或者通過制備出含多個抗原決定簇的人工抗原來制備“寬譜特異性”抗體,進行農(nóng)藥多殘留分析研究。

2、單克隆抗體的制備:

單克隆抗體制備技術最初是由K鰄ler和Milstein(1975)利用B淋巴細胞雜交瘤技術創(chuàng)立的。目前該技術已廣泛應用于疾病診斷及生物、醫(yī)學研究、環(huán)境和食品安全檢測(監(jiān)測)等方面。單抗均一性高,只和抗原某一決定簇結合,有更高的特異性,而且,產(chǎn)生抗體的單克隆細胞可在體外傳代繁殖,不受動物免疫時間限制生產(chǎn)抗體。只要管理和培養(yǎng)技術正確,抗體就可無限的產(chǎn)生。基本過程是動物免疫、細胞融合、克隆篩選、單克隆抗體性質鑒定、腹水誘發(fā)、收集和純化等。


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