
2025年02月16日 13:19通派(上海)生物科技有限公司點擊量:52
細胞:Hep-3B細胞
中文名稱:人肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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在艾滋病(AIDS)面前,嚙齒動物似乎比人類更為強大。大鼠和小鼠對人體免疫缺損病毒(HIV)具有天生的抵抗能力——這一情況也導致研究人員尋找一種AIDS小型動物模型的夙愿一直無法實現。
然而發現,一種經過基因改造的小鼠很容易感染HIV,這就為AIDS藥物的研制提供了新的幫助。
通過加入能夠使人類具有易感性的多種基因化合物,一直在嘗試培育可感染HIV的嚙齒動物,然而進展極為緩慢。
向小鼠體內移植了兩種人類攜帶的關鍵分子——病毒用它們來傳染免疫細胞,其表面受體為CD4和CCR5。但是HIV在這些動物體內并不能有效地進行自我復制,從而導致病毒數量低于其在人體中的水平。
這一復制過程是許多有效抗HIV藥物——例如蛋白酶抑制劑——的靶點,而這一小鼠模型尚無法評估此類化合物。也正是由于這些限制,這一模型對于研究HIV究竟如何導致AIDS亦作用有限。
向這些經過改造的小鼠中添加新的基因,從而避開這些殘留的障礙。并不認為這一模型在所有情況下都適用。
這種小鼠是否能夠用來評估那些在HIV開始自我復制之前就對其進行打擊的AIDS藥物。研究人員利用兩種已經批準上市的藥物——T-20,能夠阻止HIV進入細胞;
Sustiva,抑制病毒核糖核酸(RNA)轉變成脫氧核糖核酸(DNA)所必需的逆轉錄過程——對這種小鼠進行了測試。
與人類的情況類似,在這兩項試驗中,經過基因改造的小鼠體內的HIV水平下降了90%。試驗直接導致小鼠免疫細胞數量的減少,這點也與人類試驗一致。
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