當今科學技術飛速發展,有關微生物檢測的高科技方法可謂如若瀚海。雖然培養皿檢測微生物是一個古老的、傳統的檢測方法,但由于它具有可以直接分離鑒別樣品、操作方便、結果可靠等優點,所以至今仍廣泛應用于醫藥衛生,臨床檢驗、實驗動物、食品、化妝品、工農業、環保等眾多領域。在藥品質量控制、安全評價和疾病診斷中尤其發揮著重要的作用。
培養基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物試驗結果,而成品預裝培養基平皿是培養基中的一種,是由脫水培養基溶解于水中,矯正PH值,然后滅菌和分裝于平皿而成。無論是實驗室配制的培養基平皿或商品化的成品預裝培養基平皿,其質量都依賴于其制備的整個過程。采用不適宜方法制備的培養基將影響微生物的生長或復蘇,從而影響試驗結果的可靠性。所以要確保培養基平皿的質量,需特別注意以下事項:
1
選擇適宜的培養基制備方法,不得使用結塊或顏色發生改變的脫水培養基。
2
培養基滅菌應按照生產商提供的或經驗證的參數進行,避免采用不適當的加熱和滅菌條件,而引起培養基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變。
3
應確定每批培養基滅菌后的pH值(冷卻至室溫25℃測定)。若培養基處方中未列出pH值的范圍,除非經驗證表明培養基的pH值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規定值±0.2。
4
成品預裝培養基平皿應確保無菌,并且平皿不得破裂,盡量避免形成氣泡,固體培養基表面不得產生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結晶,不得污染微生物等。
5
培養基升溫滅菌過程中溫度上升緩慢或滅菌后降溫過慢,可能導致培養基的過熱或過度滅菌,一定程度上會降低微生物培養基促生長的質量,所以成品預裝培養基平皿應通過微生物促生長試驗進行驗證。
6
用于環境監控的培養基平皿必須特別防護,最好采用三層包裝和終端滅菌。不建議采用實驗室自制的培養皿通過100%預培養后用于潔凈區環境采樣,因為預培養過程中失水會影響微生物生長,且還存在培養皿被污染的可能。
7
貯藏和運輸條件應使成品培養基限度的失去水分并提供機械保護、避光保存。含瓊脂培養基平皿不得在0℃或0℃以下存放,冷凍可能破壞凝膠特性。
培養基平皿制備過程質量控制和貯藏條件是提供優質培養基的保證。潔凈區環境浮游菌、沉降菌及表面微生物監測用培養基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養基(TSA),必要時可加入適宜的中和劑;當監測結果有疑似真菌或考慮季節因素影響時,可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養基(SDA)。