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2025年02月09日 13:25通派(上海)生物科技有限公司點擊量:80
細胞:HepG2細胞
中文名稱:人肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
對囊性纖維化患者的相同致病菌的治療,在其肺部的一個區(qū)域可能有效,但在其他區(qū)域可能并非如此。
細菌在患者肺部的不同區(qū)域被分隔開來,并進化出不同的區(qū)域特異性。
研究人員發(fā)現(xiàn)了細菌營養(yǎng)需求量、宿主防御和抗菌素耐藥性等方面的差異。這些結(jié)果暗示,其他感染也可能產(chǎn)生類似的細菌多樣性。
為了弄清慢性細菌如何在抗菌素和免疫系統(tǒng)的雙重壓力下仍持續(xù)存在,解剖了通過肺移植術(shù)從囊性纖維化患者身上移除的肺,并從不同的肺部區(qū)域收集了數(shù)千個假單胞菌樣本。
該研究小組發(fā)現(xiàn),雖然所有的假單胞菌都是一個單一菌株的后代,但每個肺部區(qū)域包含了大量功能各異的“親屬”假單胞菌。
寄居在不同肺部區(qū)域的細菌在抗菌素耐藥性和毒性方面的差別非常大。這些差異將影響患者健康。
研究人員分析了這種細菌的遺傳代碼,DNA序列顯示,這些差異的出現(xiàn)是由于細菌細胞被孤立在肺部的不同區(qū)域,然后發(fā)生局部進化,就像達爾文發(fā)現(xiàn)的加拉帕戈斯群島雀鳥的進化。
DNA序列還表明,細菌經(jīng)過數(shù)年甚至數(shù)十年進化出的這些特點,可能持續(xù)存在于細菌寄居的不同肺部區(qū)域,并能提供有關(guān)過去條件和治療的“記憶”,以幫助假單胞菌更強壯。
即便當(dāng)單一菌株引發(fā)感染時,人類器官進化也能產(chǎn)生不同的相關(guān)細菌家族。這可能是讓治療十分困難的部分原因,當(dāng)對一類壓力敏感的細菌被殺死后,功能不同的兄弟細菌就占據(jù)了它們的地盤。
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