
2025年02月05日 15:37通派(上海)生物科技有限公司點擊量:32
細胞:SK-MEL-2細胞
中文名稱:人皮膚惡性黑色素瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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地球上所有的生物都依賴核糖體來合成蛋白質,對于這個龐大復雜的分子機器來說,在機體內要經過高度復雜和動態的組裝過程才能形成,而且這種組裝-拆卸-再組裝的過程也是生物機體所必需的。
研究深入探索了與一種基因突變密切相關的神經退行性病變過程,他們針對小鼠展開了研究,解析小鼠中樞刪減系統中神經細胞死亡的過程。
研究發現一種用于重復回收核糖體的特殊蛋白的缺失,會導致蛋白合成停滯不前,引起小鼠中神經細胞死亡。
進一步探討這種缺失的蛋白是否會在另外不同的遺傳背景下引起同樣的問題。但這種蛋白的缺失只有在一種特定的遺傳背景下才能引起神經細胞死亡,這表明核糖體相關的突變依賴于對其產生影響的另外一種基因。
經過反復試驗,研究最終發現了這第二個基因,即存在于大腦中的特殊tRNAs中的GTPBP2——tRNAs的作用是幫助DNA翻譯成蛋白。這種tRNA基因的突變會引起核糖體停止在一個特殊的DNA序列上,減慢蛋白合成過程。
由于這項研究采用的遺傳背景是用于構建其他人類疾病模型,因此采用這種小鼠模型的研究人員也要多加注意。
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