【人源化抗體】關(guān)于單克隆抗體技術(shù)類型介紹

2024年10月10日 10:35上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司點(diǎn)擊量：441

1.改形抗體

1986年，Jones等人成功構(gòu)建了第/一個(gè)改形抗體，又稱CDR移植抗體和人源化抗體，指將鼠單抗可變區(qū)中互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)序列取代人源抗體相應(yīng)CDR序列，重組構(gòu)成既具有鼠源性單抗特異性，又保持人抗體親和力的CDR移植抗體。

迄今為止，已有100多種鼠單抗通過(guò)CDR移植得到了人源化。基本原理:抗體重鏈和輕鏈的可變區(qū)主要由CDR和骨架區(qū)(FR)組成。其中可變區(qū)的6個(gè)CDR是負(fù)責(zé)識(shí)別和結(jié)合抗原的區(qū)域，它們直接與抗原接觸，決定了抗體的特異性。骨架區(qū)是可變區(qū)以外的其它部分，主要起著支持CDR的作用，而且它們的氨基酸組成和排列相對(duì)不易改變，因此，可以將鼠單抗的CDR移植到人單抗的骨架區(qū)，就有可能使人單抗獲得鼠單抗一樣的抗原特異性，并可以最/大限度地降低鼠單抗的異源性，這樣就得到了改形抗體。與嵌合抗體相比，改形抗體進(jìn)一步減少了抗體中鼠源部分的比例，降低了人抗鼠抗體，但仍有抗體可能導(dǎo)致抗獨(dú)te型抗體的產(chǎn)生且存在一些局限性，例如構(gòu)建方法相對(duì)復(fù)雜，操作起來(lái)費(fèi)時(shí)費(fèi)力；抗體的晶體結(jié)構(gòu)以及電腦模擬抗體的微細(xì)結(jié)構(gòu)上都有很大的問(wèn)題；降低免疫原性和保持抗原結(jié)合活性方面還有很多問(wèn)題。理所當(dāng)然，尋找既能實(shí)現(xiàn)人源化又可以保持高的免疫學(xué)活性的簡(jiǎn)單易行方法勢(shì)在必行。

2.表面氨基酸殘基人源化一一鑲面抗體

1991年由Padlan提出的與CDR移植wan全不同的降低鼠源抗體免疫原性的方法。其理論依據(jù)是分析了大量鼠單抗可變區(qū)和人單抗可變區(qū)氨基酸殘基的表面暴露情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些暴露的氨基酸殘基位置和數(shù)量都非常保守，不因?yàn)榉N屬和型別而改變。研究表面，這些暴露的氨基酸殘基是鼠源可變區(qū)免疫原性的主要來(lái)源。將鼠單抗可變區(qū)表面暴露的骨架區(qū)氨基酸殘基中與人可變區(qū)相應(yīng)的氨基酸殘基改為人源的，就可以使可變區(qū)表面人源化，消除了異源性而不影響可變區(qū)的整體空問(wèn)構(gòu)象。

3.表位印記選擇

表位印記選擇指的是一種與高/效篩選噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)相結(jié)合的人源化抗體的方法，可以通過(guò)數(shù)論篩選就能得到wan全人源的抗體。基本原理:鼠單抗的一個(gè)重鏈或者輕鏈可變區(qū)基因與人源抗體的重鏈或者輕鏈的可變區(qū)基因文庫(kù)配對(duì)，得到雜合的人鼠抗體庫(kù)。借助噬菌體抗體庫(kù)的高/效篩選方法，能迅速得到所需抗體，比CDR移植簡(jiǎn)單且能得到真正的人抗體。缺點(diǎn):篩選工作量特別大。

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