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組織/細胞裂解液重要特點以及選擇指南(MKBIO)

2018年10月04日 23:23上海懋康生物科技有限公司點擊量:940

 

 

前言:

在免疫印跡(WB)、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP),以及染色質免疫沉淀(ChIP)等許多研究組織或細胞內蛋白表達,蛋白純化以及蛋白-蛋白、蛋白-核酸間互作的各種免疫實驗內,首先要做的步就是進行組織(細胞)裂解,通過破壞細胞膜或細胞核膜的屏障,將要待研究的對象釋放到體外環境中。為此,擁有合適的組織/細胞裂解液是開展實驗重要的一環。

 

針對各種下游實驗的特點,懋康生物(MKBio)提供幾種常見的組織/細胞裂解液,基本涵蓋用戶需求。

 

總表:各種組織/細胞裂解液主要特點和應用差異(MKBIO)

產品

貨號

MP1501

MP1502

MP1503

MP1504

MP1505

MP1506

MP1507

MP1508

產品

名稱

RIPA裂解液(強)

RIPA裂解液(中)

RIPA裂解液(弱)

WB/IP裂解液

NP-40裂解液

SDS裂解液

RIPA裂解液(強,無抑制劑)

WB/IP裂解液(無抑制劑)

有效裂解成分

1% Triton X-100,1%脫氧膽酸鈉,0.1% SDS

1% NP-40,0.5%脫氧膽酸鈉,0.1% SDS

1% NP-40,0.25%脫氧膽酸鈉

1% Triton X-100

1% NP-40

1% SDS

1% Triton X-100,1%脫氧膽酸鈉,0.1% SDS

1% Triton X-100

裂解強度

溫和

溫和

溫和

溫和

對膜蛋白的提取

很好

較好

一般

一般

一般

很好

很好

一般

對胞漿蛋白的提取

很好

很好

很好

很好

很好

很好

很好

很好

對核蛋白的提取

很好

較好

較好

較好

較好

很好

很好

較好

胞漿磷酸化蛋白提取

很好

很好

很好

很好

很好

很好

很好

很好

核轉錄因子提取

很好

很好

很好

很好

很好

很好

很好

很好

蛋白酶抑制劑

含有

含有

含有

含有

含有

含有

不含

不含

磷酸酶抑制劑

含有

含有

含有

含有

含有

含有

不含

不含

主要用途

WB,IP

WB,IP

WB,IP,Co-IP

WB,IP,Co-IP

WB,IP,Co-IP

WB,ChIP

WB,IP

WB,IP,Co-IP

 

組織/細胞裂解液選擇說明:

a)   對于普通的WB,IP,Co-IP,推薦使用WB/IP裂解液(# MP1504-100ML),經此裂解所得的產物沒有非常粘滯的透明狀DNA團塊形成,不必采用超聲處理等就可以非常理想地用于后續操作。另外,此裂解液裂解的產物也適合用于磷酸化蛋白的WB檢測。

b)   對于某些特殊蛋白的IP,如果WB/IP裂解液(# MP1504-100ML)效果不理想,可嘗試用RIPA(強,中,弱)或NP-40裂解液。若發現IP背景很高,說明非特異性蛋白被沉淀下來,則需選用裂解強度較高的裂解液,如RIPA(強或中)。如果發現目的蛋白無法被沉淀下來,說明裂解液的強度過強,可使用較溫和的裂解液如RIPA(弱)或NP-40裂解液。

c)   對于某些難溶解蛋白的WB,如果WB/IP裂解液(# MP1504-100ML)效果不理想,可嘗試使用裂解強度更高的裂解液如RIPA(強,中)或SDS裂解液。

d)   對于特定用途需要自行添加特定抑制劑或不需添加抑制劑,可考慮選擇RIPA裂解液(強,無抑制劑)(# MP1507-100ML)或WB/IP裂解液(無抑制劑)(# MP1508-100ML),后者很多情況下兼容酶活性和生物小分子的檢測,具體兼容性如何請自行測試,我司無相應數據提供。

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供產品。

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