2015年08月13日 09:24通派（上海）生物科技有限公司點擊量：1015
免疫細胞化學（immunocytochemistry）或稱免疫組織化學（immunohistochemistry），是指用經標記的特異性抗體在組織細胞原位通過特異性抗原抗體反應和化學的呈色反應，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項技術。
它將抗原抗體免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來，借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像與放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種細胞組織成分，如蛋白質、多肽、核酸、部分類酯、多糖、激素、病原體（寄生蟲、細菌病毒）、受體、神經介質、腫瘤的標記物（抗原或相關抗原）等。
一般認為，凡具有抗原性或半抗原性物質都可以用免疫細胞化學方法檢查并顯示出來，并可在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其性質定位，還可以利用細胞分光光度計、圖像分析儀、共聚焦顯微鏡等進行細胞原位定量測定。
免疫組織細胞染色技術發展的簡要歷史
Coons及其同事于1941年應用熒光素標記的抗體檢測肺組織中的肺炎雙球菌獲得成功，揭開了免疫細胞化學技術的新篇章。隨后，Nakane建立了酶標記的抗體技術，而Sternberger在此基礎上進一步通過改良所建立起來的辣根過氧化酶-抗過氧化物酶（PAP）技術使得技術得到了廣泛的應用。
等到上世紀80年代，抗生物素-生物素（ABC）法、免疫金-銀染色法、半抗原標記法、免疫電鏡技術等相繼誕生，進一步豐富了免疫化學技術的內涵，使之成為當今生物醫學中重要的研究手段，在生物基礎研究、臨床診斷發揮著重要作用。
免疫組織細胞染色技術的基本過程
免疫組織化學的全過程包括：
（1）抗原的提取與純化；
（2）免疫動物或細胞融合，制備特異性抗體以及抗體的純化；
（3）標記抗體的制備；
（4）組織細胞標本的制備；
（5）反應及呈色反應；
（6）結果的觀察與分析。
有關抗原的提取與純化、抗體的制備與純化的方法請參考相關免疫學實驗技術手冊，本文將結合不同類型的技術選擇性介紹標記抗體的制備、組織細胞標本的制備、免疫化學反應等技術過程。
二、組織細胞標本的制備
（一）細胞標本的取材
1、體細胞取材方法
印片法：主要用于從活組織檢查標本和手術切除標本中獲取細胞。首先將標本剖開，zui大程度暴露組織病變區，然后將載玻片輕壓于病變組織區，吸附脫落的細胞。
穿刺取樣涂片法：用細針穿刺從實質性器官（如肝、腎、脾、淋巴結、軟組織、骨髓）的病變區吸取病變區的體液，然后進行涂片。
體液沉淀涂片法：主要適用于胸水、腹水、尿液、腦脊液等含細胞較少的標本，先通過離心獲取細胞沉淀，經適當稀釋后再進行涂片。
2、培養細胞取材方法
（1） 細胞爬片法：適合于貼壁生長的培養細胞。將干凈的蓋玻片放置入培養液中，細胞便會自然貼附在其上。
（2） 涂片法：適合于懸浮生長的培養細胞。直接取懸浮生長的培養細胞或通過離心收集細胞，再經適當的洗滌和稀釋后進行涂片。
3、組織材料的獲取
主要通過組織切片技術獲得。根據包埋劑的不同可分為：冰凍切片、石蠟切片、塑料切片、超薄切片、碳臘切片等類型。
（二）細胞和組織的固定
固定的目的是為了更好地將細胞和組織的原有形態結構及成分保留下來，讓蛋白質變性，使內源性消化酶失活。對免疫組化而言，可用的固定劑種類多樣，性能也不盡相同，在使用時應注意考慮不同固定劑對抗原的影響，防止抗原的彌散以及活性的丟失。
常見的固定劑有醛類（如10％的中性緩沖福爾馬林，4％的多聚甲醛等）、非醛類（如碳化二亞胺、對苯醌等）、丙酮及醇類固定劑。常見的固定方法有浸入法和灌注法等。
上一篇：多奧科技榮獲生物識別
下一篇：車輛檢測儀檢測技術剖析
本網轉載并注明自其它來源（非智慧城市網www.3121000.com）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點或和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
