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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-24 00:41:32瀏覽次數(shù):342次
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扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
15515 犁鼻1受體2(VN1R2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vomeronasal 1 Receptor 2 (VN1R2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15516 犁鼻1受體3(VN1R3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vomeronasal 1 Receptor 3 (VN1R3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15517 犁鼻1受體4(VN1R4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vomeronasal 1 Receptor 4 (VN1R4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15518 犁鼻1受體5(VN1R5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vomeronasal 1 Receptor 5 (VN1R5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15519 酮戊二酸受體1(OXGR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxoglutarate Receptor 1 (OXGR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15520 琥珀酸受體1(SUCNR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Succinate Receptor 1 (SUCNR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15521 Synerginγ蛋白(SYNRγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synergin Gamma (SYNRg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15522 免疫球蛋白λ(Igλ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin Lambda (Igl) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15523 鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sphingomyelin Phosphodiesterase 3 (SMPD3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15524 鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMPD4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15525 Advillin蛋白(AVIL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Advillin (AVIL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15526 Podocan蛋白(PODN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Podocan (PODN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15527 K-乙酰轉移酶2A(KAT2A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for K-Acetyltransferase 2A (KAT2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15528 K-乙酰轉移酶2B(KAT2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for K-Acetyltransferase 2B (KAT2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15529 K-乙酰轉移酶5(KAT5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for K-Acetyltransferase 5 (KAT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15530 N-乙酰轉移酶1(NAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 1 (NAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15531 N-乙酰轉移酶2(NAT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 2 (NAT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15532 N-乙酰轉移酶5(NAT5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 5 (NAT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15533 N-乙酰轉移酶6(NAT6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 6 (NAT6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15534 鈣同線蛋白3(CLSTN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calsyntenin 3 (CLSTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15535 鈣同線蛋白1(CLSTN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calsyntenin 1 (CLSTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15536 基質(zhì)抗原3(STAG3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stromal Antigen 3 (STAG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15537 基質(zhì)抗原2(STAG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stromal Antigen 2 (STAG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15538 基質(zhì)抗原1(STAG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stromal Antigen 1 (STAG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15539 二甲基*脫氫酶(DMGDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dimethylglycine Dehydrogenase (DMGDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15540 酯酶D(ESD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Esterase D (ESD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15541 外生骨疣蛋白1(EXT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exostoses 1 (EXT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15542 外生骨疣蛋白2(EXT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exostoses 2 (EXT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15543 羥酰*水解酶(HAGH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hydroxyacylglutathione Hydrolase (HAGH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15544 溶血磷脂酰甘油酰基轉移酶1(LPGAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidylglycerol Acyltransferase 1 (LPGAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15545 N-乙酰葡糖胺激酶(NAGK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetylglucosamine Kinase (NAGK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15546 N-乙酰*合酶(NAGS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetylglutamate Synthase (NAGS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15547 磷酸核糖甲酰*脒合酶(PFAS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphoribosylformylglycinamidine Synthase (PFAS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15548 異染色質(zhì)蛋白1(HP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heterochromatin Protein 1 (HP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15549 染色框同源物2(CBX2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chromobox Homolog 2 (CBX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15550 染色框同源物1(CBX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chromobox Homolog 1 (CBX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15551 阻抑素2(PHB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prohibitin 2 (PHB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15552 Bassoon蛋白(BSN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bassoon (BSN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15553 小腦肽3(CBLN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cerebellin 3 (CBLN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15554 小腦肽2(CBLN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cerebellin 2 (CBLN2) 48T/96T Homo sapiens扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒 (Human)
15555 小腦肽1(CBLN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cerebellin 1 (CBLN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15556 磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphoglycerate Kinase 2 (PGK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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