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上海紀寧酶聯科技有限公司
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鴨*(cAMP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
鴨*(cAMP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鴨*(cAMP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
13881 Bcl2相關髓細胞白血病序列1(MCL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myeloid Cell Leukemia Sequence 1, Bcl2 Related (MCL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13882 IgG-Fc片段結合蛋白(FcγBP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Binding Protein (FcgBP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13883 序列相似家族132成員A(FAM132A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 132, Member A (FAM132A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13884 形成素結合蛋白1(FNBP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Formin Binding Protein 1 (FNBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13885 肌脂蛋白(SLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sarcolipin (SLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13886 D-多巴色素變位酶(DDT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13887 歸巢關聯細胞黏附分子(HCAM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Homing Associated Cell Adhesion Molecule (HCAM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13888 鈣網蛋白(CRT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calreticulin (CRT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13889 鈣腔蛋白(CALU)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calumenin (CALU) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13890 成纖維細胞生長因子19(FGF19)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 19 (FGF19) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13891 S100鈣結合蛋白A8(S100A8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13892 白介素17F(IL17F)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 17F (IL17F) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13893 ⅩⅢ型膠原(COL13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type XIII (COL13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13894 Ⅶ型膠原(COL7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type VII (COL7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13895 D-多巴色素變位酶(DDT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13896 彈性蛋白酶3B(ELA3B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Elastase 3B (ELA3B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13897 泛素關聯蛋白2(UBAP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Associated Protein 2 (UBAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13898 尿溶蛋白3A(UPK3A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Uroplakin 3A (UPK3A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13899 序列相似家族20成員A(FAM20A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 20, Member A (FAM20A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13900 半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 1 (CYSLTR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13901 彈性蛋白酶(ELA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Elastase 2A (ELA2A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13902 碳分解代謝物阻遏4樣蛋白(CCRN4L)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbon Catabolite Repression 4 Like Protein (CCRN4L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13903 巰基丙酮酸硫轉移酶(MPST)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13904 賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13905 *酶(GLS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutaminase (GLS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13906 磷酸二酯酶4D(PDE4D)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific (PDE4D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13907 糖磺基轉移酶9(CHST9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbohydrate Sulfotransferase 9 (CHST9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13908 微管關聯蛋白4(MAP4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein 4 (MAP4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13909 雙特異性磷酸酶1(DUSP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 1 (DUSP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13910 細胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 1A2 (CYP1A2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13911 細胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13912 δ樣蛋白4(δLL4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Delta Like Protein 4 (dLL4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13913 T-框蛋白3(TBX3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for T-Box Protein 3 (TBX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13914 胃脂酶(LIPF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipase, Gastric (LIPF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13915 粘蛋白2(MUC2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 2 (MUC2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13916 纖維蛋白原β(FGβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibrinogen Beta (FGb) 48T/96T Rattus norvegicus 鴨*(cAMP)ELISA試劑盒(Rat)
13917 非神經元性烯醇化酶(NNE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Enolase, Non Neuronal (NNE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13918 Ⅱ型膠原α1(COL2α1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type II Alpha 1 (COL2a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13919 C-Mer原癌基因*激酶(MERTK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for C-Mer Proto Oncogene Tyrosine Kinase (MERTK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5鴨*(cAMP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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