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上海紀寧酶聯科技有限公司
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鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
13681 碳酸酐酶ⅤB(CA5B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial (CA5B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13682 谷光甘肽合成酶(GSS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione Synthetase (GSS) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13683 肝配蛋白A3(EFNA3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ephrin A3 (EFNA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13684 中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Midkine (MK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13685 Slit同源物3(Slit3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Slit Homolog 3 (Slit3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13686 精氨酰tRNA合成酶(RARS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Arginyl tRNA Synthetase (RARS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13687 電*協同轉運蛋白4(NBC4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Electrogenic Sodium Bicarbonate Cotransporter 4 (NBC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13688 Ras相關C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13689 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I (DNASE1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13690 非受體型蛋白*磷酸酶11(PTPN11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type 11 (PTPN11) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13691 賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13692 兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Catechol-O-Methyltransferase (COMT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13693 核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1 (RPS6Kb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13694 骨髓基質細胞抗原1(BST1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Marrow Stromal Cell Antigen 1 (BST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13695 Saitohin蛋白(STH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Saitohin (STH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13696 腺苷A2b受體(ADORA2b)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenosine A2b Receptor (ADORA2b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13697 鳥苷酸環化酶激活因子2B(GUCA2B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Guanylate Cyclase Activator 2B (GUCA2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13698 組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13699 饑餓素(GHRL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ghrelin (GHRL) 48T/96T Ovis aries; Ovine (Sheep)
13700 生長分化因子11(GDF11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13701 SPARC樣蛋白1(SPARCL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for SPARC Like Protein 1 (SPARCL1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13702 防御素β112(DEFβ112)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Beta 112 (DEFb112) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13703 血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13704 IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲa(FcγR3A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIa Receptor (FcgR3A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13705 信號傳導轉錄激活因子3(STAT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 3 (STAT3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13706 載脂蛋白C3(APOC3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein C3 (APOC3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13707 載脂蛋白C2(APOC2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein C2 (APOC2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13708 Janus激酶2(JAK2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Janus Kinase 2 (JAK2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13709 旁血小板溶蛋白(PPL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Periplakin (PPL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13710 Engrailed同源框蛋白2(EN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Engrailed Homeobox Protein 2 (EN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13711 膠質細胞系來源神經營養因子受體α1(GFRα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor Receptor Alpha 1 (GFRa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13712 腫瘤壞死因子α誘導蛋白6(TNFαIP6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha Induced Protein 6 (TNFaIP6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13713 多聚A特異性核糖核酸酶(PARN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Poly A Specific Ribonuclease (PARN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13714 氯化物細胞內通道蛋白1(CLIC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chloride Intracellular Channel Protein 1 (CLIC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13715 醌型二氫蝶啶還原酶(QDPR)檢測試劑盒鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Quinoid Dihydropteridine Reductase (QDPR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13716 肌酸轉運蛋白(CRT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Creatine Transporter (CRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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