魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

12066 血漿*過氧化物酶(GPX3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 3, Plasma (GPX3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12067 乙酰*酯酶(AchE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Acetylcholinesterase (AchE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12068 Ⅹ型膠原(COL10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type X (COL10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12069 *1(VB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vitamin B1 (VB1) 48T/96T General
12070 硒蛋白P1(SEPP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Selenoprotein P1, Plasma (SEPP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12071 硒蛋白P1(SEPP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Selenoprotein P1, Plasma (SEPP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12072 載脂蛋白B(APOB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Apolipoprotein B (APOB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12073 組織蛋白酶S(CTSS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cathepsin S (CTSS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12074 血紅素結(jié)合蛋白(HPX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Hemopexin (HPX) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12075 補(bǔ)體成分4(C4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complement Component 4 (C4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12076 血管活性腸肽(VIP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12077 內(nèi)皮抑素(ES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endostatin (ES) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12078 血管抑素(ANG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Angiostatin (ANG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12079 肌肉生長抑制素(MSTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myostatin (MSTN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12080 免疫球蛋白G2(IgG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Immunoglobulin G2 (IgG2) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
12081 末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-9) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12082 破骨細(xì)胞關(guān)聯(lián)受體(OSCAR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteoclast Associated Receptor (OSCAR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12083 高遷移率族蛋白1(HMG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12084 高遷移率族蛋白1(HMG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12085 激活蛋白C(APC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Activated Protein C (APC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12086 促卵泡素(FSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone (FSH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12087 載脂蛋白E(APOE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Apolipoprotein E (APOE) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12088 氧化低密度脂蛋白(OxLDL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Oxidized Low Density Lipoprotein (OxLDL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12089 氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12090 CD24分子(CD24)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 24 (CD24) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12091 生長激素(GH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Growth Hormone (GH) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12092 白介素19(IL19)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 19 (IL19) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12093 透明質(zhì)酸酶(HAase)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Hyaluronidase (HAase) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12094 白介素22(IL22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 22 (IL22) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12095 白細(xì)胞介素24(IL24)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 24 (IL24) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12096 角化粒(CDSN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Corneodesmosin (CDSN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12097 抑制素A(INHA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Inhibin A (INHA) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12098 抑制素B(INHB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Inhibin B (INHB) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12099 早期生長應(yīng)答因子2(EGR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Early Growth Response Protein 2 (EGR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12100 唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素1(SIGLEC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 1 (SIGLEC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12101 降鈣素(CT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Calcitonin (CT) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12102 堿性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12103 生長激素(GH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Growth Hormone (GH) 48T/96T魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 Equus caballus; Equine (Horse)
12104 基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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