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上海紀寧酶聯科技有限公司
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鯉魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
鯉魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鯉魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
11985 S100鈣結合蛋白(S100)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein (S100) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11986 粘蛋白1(MUC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 1 (MUC1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11987 粘蛋白1(MUC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 1 (MUC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11988 粘蛋白1(MUC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 1 (MUC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11989 睫狀神經營養因子(CNTF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF) 48T/96T Chicken (Gallus)
11990 睫狀神經營養因子(CNTF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11991 睫狀神經營養因子(CNTF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11992 上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Epithelial (CDHE) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11993 上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Epithelial (CDHE) 48T/96T Chicken (Gallus)
11994 上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Epithelial (CDHE) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11995 嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11996 嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11997 嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11998 嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11999 白介素8受體α(IL8Rα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12000 白介素8受體α(IL8Rα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12001 內分泌腺來源血管內皮生長因子(EG-VEGF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12002 紅細胞生成素(EPO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Erythropoietin (EPO) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
12003 紅細胞生成素(EPO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Erythropoietin (EPO) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12004 紅細胞生成素(EPO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Erythropoietin (EPO) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
12005 E選擇素(SELE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12006 E選擇素(SELE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12007 E選擇素(SELE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
12008 E選擇素(SELE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12009 血管內皮細胞蛋白C受體(PROCR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein C Receptor, Endothelial (PROCR) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12010 血管內皮細胞蛋白C受體(PROCR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein C Receptor, Endothelial (PROCR) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12011 顆粒酶M(GZMM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Granzyme M (GZMM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12012 顆粒酶M(GZMM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Granzyme M (GZMM) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12013 顆粒酶M(GZMM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Granzyme M (GZMM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12014 凋亡相關因子(FAS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis (FAS) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12015 凋亡相關因子(FAS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis (FAS) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
12016 凋亡相關因子配體(FASL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
12017 酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12018 酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
12019 酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1) 48T/96T Chicken (Gallus)
12020 酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12021 突觸囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptotagmin I (SYT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12022 25kDa突觸關聯蛋白(SNAP25)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptosomal Associated Protein 25kDa (SNAP25) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12023 補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12024 補體1抑制因子(C1INH)鯉魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12025 促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5鯉魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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