HeLa229宮頸癌細(xì)菌破壁方法:細(xì)菌破壁是成功提取DNA的關(guān)鍵步驟之一。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層構(gòu)成堅(jiān)韌的三維立體結(jié)構(gòu),而陰性菌肽聚糖層構(gòu)成疏松的二維結(jié)構(gòu),因此不同種類細(xì)菌的破壁方法不同。目前破壁方法有十二烷基磺酸鈉(SDS)裂解法、*法、反復(fù)凍融法、研磨法、超聲波法等。不同細(xì)菌對(duì)溶解劑有不同的抗性,溶解細(xì)菌前需先取少量菌懸液,加一定濃度的溶解劑,看是否能溶解菌體。
HeLa229宮頸癌豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 Porcine thrombomodulin,TM ELISA試劑盒
豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒 Porcine plaet-derived growth factor,PDGF ELISA試劑盒
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA試劑盒
豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA試劑盒
豬組織因子(TF)ELISA試劑盒 Porcine Tissue factor,TF ELISA試劑盒
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA試劑盒
豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 Porcine Methemoglobin,MHB ELISA試劑盒
豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒 Porcine procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA試劑盒
豬低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒 Porcine low molecular weight heparin,LMWH ELISA試劑盒
豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒 Porcine listeriolysin O,LLO ELISA試劑盒
雞極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒 Chicken very low density lipoprotein,VLDL ELISA試劑盒
雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA試劑盒
雞胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 Chicken Glucagon,GC ELISA試劑盒
雞甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 Chicken Thyroxine,T4 ELISA試劑盒
若SDS和*均能溶解菌體,使用既廉價(jià)又能抑制DNase的SDS;若需用*應(yīng)加入SDS促進(jìn)溶菌;如果60℃溶菌過程緩慢,可將溫度提高到70~75℃;有些菌也可用脫氧膽酸鹽破裂細(xì)胞膜溶解菌體。對(duì)溶解劑有抗性的菌類,可在含*或*的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使其不形成細(xì)胞壁。如SDS和酶破壁效果不理想,可同時(shí)用反復(fù)凍融、超聲波或氧化鋁和玻璃粉研磨輔助破壁。
細(xì)胞污染解決方法:污染表現(xiàn)是很碎小的黑色聚堆的東西(能想象一堆碎松針堆個(gè)圓嗎),高倍鏡下似乎能動(dòng)(或者只是物理運(yùn)動(dòng)),動(dòng)作幅度不大,發(fā)展較慢,出現(xiàn)后對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和狀態(tài)看不出影響,但一旦吹散則發(fā)展迅速,污染明顯,細(xì)胞死亡,培養(yǎng)基發(fā)黃. 這是結(jié)團(tuán)的細(xì)菌。開始長(zhǎng)得很慢,一旦擴(kuò)散就很快使培養(yǎng)基變渾濁。出現(xiàn)染菌只能丟掉,重新開始培養(yǎng)。不必試圖把菌殺死保留細(xì)胞,因?yàn)檫@一般無法辦到。
高倍鏡下看“團(tuán)”的周圍,其實(shí)可以看打到很多細(xì)菌在不停地“打彎”運(yùn)動(dòng)。如果發(fā)現(xiàn)得早, 可以盡可能地將其稀釋除掉控制的辦法就是多開紫外,實(shí)驗(yàn)前東西現(xiàn)用現(xiàn)滅,從瓶子里取培養(yǎng)基時(shí)多用移液管少用槍頭,勤快打掃無菌室。