SK-RC-42腎癌細胞細菌破壁方法:細菌破壁是成功提取DNA的關鍵步驟之一。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層構成堅韌的三維立體結構,而陰性菌肽聚糖層構成疏松的二維結構,因此不同種類細菌的破壁方法不同。目前破壁方法有十二烷基磺酸鈉(SDS)裂解法、*法、反復凍融法、研磨法、超聲波法等。不同細菌對溶解劑有不同的抗性,溶解細菌前需先取少量菌懸液,加一定濃度的溶解劑,看是否能溶解菌體。
SK-RC-42腎癌細胞BYP 瓊脂培養基基礎 250g/瓶 用于巴斯德氏菌的選擇性分離培養,需添加消化血液
布氏菌疫苗培養基(液體) 1 萬 ml/袋 用于布氏菌疫苗
布氏活菌苗培養基(含瓊脂) 250g/瓶 用于布氏活菌苗和布氏菌的傳代
雞副嗜血桿菌疫苗培養基 1 萬 ml/袋 用于制備雞鼻炎菌苗
鏈球菌疫苗培養基 1 萬 ml/袋 培養鏈球菌,用于豬及羊鏈球菌滅活菌苗和檢驗
豬丹毒疫苗培養基 1 萬 ml/袋 用于豬丹毒滅活菌苗、活菌苗
豬肺疫疫苗培養基 1 萬 ml/袋 用于豬肺疫疫苗制備
馬丁肉湯 250g/瓶 用于多殺性巴桿菌、豬丹毒菌、豬肺疫、鏈球菌菌苗及檢驗
馬丁肉湯 1 萬 ml/袋 用于多殺性巴桿菌、豬丹毒菌、豬肺疫、鏈球菌菌苗及檢驗
馬丁瓊脂 250g/瓶 用于多殺性巴桿菌、豬丹毒菌、豬肺疫、鏈球菌菌苗及檢驗
若SDS和*均能溶解菌體,使用既廉價又能抑制DNase的SDS;若需用*應加入SDS促進溶菌;如果60℃溶菌過程緩慢,可將溫度提高到70~75℃;有些菌也可用脫氧膽酸鹽破裂細胞膜溶解菌體。對溶解劑有抗性的菌類,可在含*或*的培養基中培養,使其不形成細胞壁。如SDS和酶破壁效果不理想,可同時用反復凍融、超聲波或氧化鋁和玻璃粉研磨輔助破壁。
細胞污染解決方法:污染表現是很碎小的黑色聚堆的東西(能想象一堆碎松針堆個圓嗎),高倍鏡下似乎能動(或者只是物理運動),動作幅度不大,發展較慢,出現后對細胞生長和狀態看不出影響,但一旦吹散則發展迅速,污染明顯,細胞死亡,培養基發黃. 這是結團的細菌。開始長得很慢,一旦擴散就很快使培養基變渾濁。出現染菌只能丟掉,重新開始培養。不必試圖把菌殺死保留細胞,因為這一般無法辦到。
高倍鏡下看“團”的周圍,其實可以看打到很多細菌在不停地“打彎”運動。如果發現得早, 可以盡可能地將其稀釋除掉控制的辦法就是多開紫外,實驗前東西現用現滅,從瓶子里取培養基時多用移液管少用槍頭,勤快打掃無菌室。