SMMC-7721肝癌細胞細菌破壁方法 細菌破壁是成功提取DNA的關鍵步驟之一。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層構成堅韌的三維立體結構,而陰性菌肽聚糖層構成疏松的二維結構,因此不同種類細菌的破壁方法不同。目前破壁方法有十二烷基磺酸鈉(SDS)裂解法、*法、反復凍融法、研磨法、超聲波法等。不同細菌對溶解劑有不同的抗性,溶解細菌前需先取少量菌懸液,加一定濃度的溶解劑,看是否能溶解菌體。SMMC-7721肝癌細胞若SDS和*均能溶解菌體,使用既廉價又能抑制DNase的SDS;若需用*應加入SDS促進溶菌;如果60℃溶菌過程緩慢,可將溫度提高到70~75℃;有些菌也可用脫氧膽酸鹽破裂細胞膜溶解菌體。對溶解劑有抗性的菌類,可在含*或*的培養基中培養,使其不形成細胞壁。如SDS和酶破壁效果不理想,可同時用反復凍融、超聲波或氧化鋁和玻璃粉研磨輔助破壁
本展示*產品:小分子量蛋白質標準/小分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳小分子量標準蛋白質/Protein little MW marker 6200~66200,粉末,5條帶 20次/600ug/支 Amresco
SDS-PAGE蛋白質低分子量標準/低分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量標準蛋白質/ Mid/SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins 14400~97400,粉末,6條帶 20次/240ug/支 Amresco
14400~97400,液體,即用型,6條帶 20次/200ul/支 Amresco
14.4-116kDa分子量MARK/14.4-116kDa Protein Molecular weight Mark 14400~116000,液體,7條帶 2×1毫升 Amresco
19-119kDa預先染色分子量MARK/Prestained Protein Molecular weight Mark 19000~119000,液體,6條帶 2×0.25毫升 Amresco
15-150kDa精確分子量MARK/Precise Protein Molecular weight Mark 15000~150000,液體,7條帶 200微升/支 Amresco
SDS-PAGE蛋白質次高分子標準/次高分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳次高分子量標準蛋白質/SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins 43000~200000,粉末,5條帶 10次/100ug/支 Amresco
SDS-PAGE蛋白質中分子量/中分子量標準蛋白/中分子MARK/Middle range protein MW marker 53000~212000,凍干粉 175ug/支 Pharmacia17-0615-01
SDS-PAGE蛋白質高分子量/高分子量標準蛋白/高分子MARK/High range protein MW marker 67000~669000,凍干粉 250ug/支 Pharmacia17-0445-01原裝
低范圍RNA Ladder/RiboRuler Low range RNA Ladder 片段:1000,800,600,400,300,200,100 100ul/支 Amresco
高范圍RNA Ladder/RiboRuler High range RNA Ladder 片段:6000,4000,3000,2000,1500,1000,500,200 100ul/支 Amresco
50bp DNA Ladder/DL50 片段:50,100,150,200,250,300,400,500bp 50次/300ul/支 Amresco
100bp DNA Ladder I/DL100 片段:100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1500bp 50次/300ul/支 Amresco
100bp DNA Ladder Ⅱ/DL3000 片段:100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、3000bp 50次/300ul/支 Amresco
1kb DNA LadderⅡ 片段:65、75、396、517、1000、1600、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000、11000bp 50次/300ul/支 Amresco
DNA Marker I 片段:100、200、300、400、500、600bp 50次/300ul/支 Amresco
DNA Marker Ⅱ 片段:100、300、500、700、900、1000、1200bp 50次/300ul/支 Amresco
DNA Marker Ⅲ 片段:200、500、800、1200、2000、3200、4000bp 50次/300ul/支 Amresco
DNA Marker Ⅴ 片段:200、400、700、1000、1500、2000bp 50次/300ul/支 Amresco
細胞污染解決方法:污染表現是很碎小的黑色聚堆的東西(能想象一堆碎松針堆個圓嗎),高倍鏡下似乎能動(或者只是物理運動),動作幅度不大,發展較慢,出現后對細胞生長和狀態看不出影響,但一旦吹散則發展迅速,污染明顯,細胞死亡,培養基發黃. 這是結團的細菌。開始長得很慢,一旦擴散就很快使培養基變渾濁。出現染菌只能丟掉,重新開始培養。不必試圖把菌殺死保留細胞,因為這一般無法辦到。
高倍鏡下看“團”的周圍,其實可以看打到很多細菌在不停地“打彎”運動。如果發現得早, 可以盡可能地將其稀釋除掉控制的辦法就是多開紫外,實驗前東西現用現滅,從瓶子里取培養基時多用移液管少用槍頭,勤快打掃無菌室。
細胞研究的發展:隨著細胞生物學尤其是干細胞研究的快速發展,在細胞治療領域已經進行了大量的探索,取得了一系列的令人振奮的成果,且部分基礎研究成果已經在心血管系統疾病、神經系統疾病、肌肉骨骼相關疾病、糖尿病等的臨床試驗中得到應用,向人們展示了其廣闊的應用前景。