Hep-2喉癌細胞細菌破壁方法:細菌破壁是成功提取DNA的關鍵步驟之一。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層構成堅韌的三維立體結構,而陰性菌肽聚糖層構成疏松的二維結構,因此不同種類細菌的破壁方法不同。目前破壁方法有十二烷基磺酸鈉(SDS)裂解法、*法、反復凍融法、研磨法、超聲波法等。不同細菌對溶解劑有不同的抗性,溶解細菌前需先取少量菌懸液,加一定濃度的溶解劑,看是否能溶解菌體。
Hep-2喉癌細胞若SDS和*均能溶解菌體,使用既廉價又能抑制DNase的SDS;若需用*應加入SDS促進溶菌;如果60℃溶菌過程緩慢,可將溫度提高到70~75℃;有些菌也可用脫氧膽酸鹽破裂細胞膜溶解菌體。對溶解劑有抗性的菌類,可在含*或*的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使其不形成細胞壁。如SDS和酶破壁效果不理想,可同時用反復凍融、超聲波或氧化鋁和玻璃粉研磨輔助破壁。
D-2-氨基丁酸/D(-)-2-氨基丁酸/D-a-氨基酪酸/D-a-氨基正丁酸/(R)-2-氨基丁酸/2-氨基丁酸/D-2-Aminobutyric acid BR,99% 1克 Amresco
5克 Amresco
25克 Amresco
DL-2-氨基丁酸/DL-α-氨基丁酸/2-氨基丁酸/α-氨基丁酸/DL-α-氨基酪酸/DL-2-Aminobutyric acid BR,99% 25克 Amresco
100克 Amresco
L-高苯*/S-苯基丁氨酸/L-2-氨基-4-苯基丁酸/L-Homophenylalanine BR,98% 1克 Amresco
5克 Amresco
25克 Amresco
D-高苯*/D-苯基丁氨酸/R-苯基丁氨酸/D-Homophenylalanine BR,98% 1克 Amresco
5克 Amresco
DL-高苯*/2-氨基-4-苯基/DL-Homophenylalanine BR,98% 1克 Amresco
5克 Amresco
L-高苯*乙酯鹽酸鹽/(S)-(+)-2-氨基-4-苯基丁酸乙酯鹽酸鹽/L-Homophenylalanine ethyl ester hydrochloride BR,98% 1克 Amresco
5克 Amresco
BOC-L-高苯*/(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸/BOC-L-Homophenylalanine BR,98% 1克 Amresco
5克 Amresco
BOC-D-高苯*/(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸/BOC-D-Homophenylalanine BR,98% 1克 Amresco
5克 Amresco
細胞污染解決方法:污染表現(xiàn)是很碎小的黑色聚堆的東西(能想象一堆碎松針堆個圓嗎),高倍鏡下似乎能動(或者只是物理運動),動作幅度不大,發(fā)展較慢,出現(xiàn)后對細胞生長和狀態(tài)看不出影響,但一旦吹散則發(fā)展迅速,污染明顯,細胞死亡,培養(yǎng)基發(fā)黃. 這是結團的細菌。開始長得很慢,一旦擴散就很快使培養(yǎng)基變渾濁。出現(xiàn)染菌只能丟掉,重新開始培養(yǎng)。不必試圖把菌殺死保留細胞,因為這一般無法辦到。
高倍鏡下看“團”的周圍,其實可以看打到很多細菌在不停地“打彎”運動。如果發(fā)現(xiàn)得早, 可以盡可能地將其稀釋除掉控制的辦法就是多開紫外,實驗前東西現(xiàn)用現(xiàn)滅,從瓶子里取培養(yǎng)基時多用移液管少用槍頭,勤快打掃無菌室。