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上海撫生實業有限公司
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人14-3-3蛋白Elisa Kit檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
人14-3-3蛋白Elisa KitHuman 14-3-3 Protein ELISA Kit
14-3-3是一個豐富的廣泛表達的蛋白家族，是一個可以自發聚集成二聚體的多功能蛋白質。初在腦脊液提取物中檢測出14-3-3蛋白的相對高豐度。14-3-3廣泛分布于從植物到哺乳動物等所有真核生物中，哺乳動物有7種異構體，大部分以同源或異源二聚體形式存在于細胞質中，與多種細胞蛋白結合并相互作用。14-3-3以穩定的同源/異源二聚體形式聚集在一起，能同時結合兩個配體。所有14-3-3的三級結構都極其相似，哺乳動物14-3-3蛋白是由兩個單體連接形成的杯狀二聚體結構，每個單體由9個α螺旋（αA～αI）組成，反向平行排列成L型結構，彼此間被一短環間隔，其中αC和αD的氨基酸序列長（30～34個氨基酸殘基），它們跨越整個單體并連接形成一個卷曲的螺旋結構。二聚體界面由一個單體的αA與另一個單體的αC和αD構成，其中含有疏水性殘基和極性殘基，形成高度保守的兼性溝槽。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的人14-3-3蛋白人14-3-3蛋白抗體為單克隆人14-3-3蛋白人14-3-3蛋白抗體，檢測相人14-3-3蛋白人14-3-3蛋白抗體為多克隆人14-3-3蛋白人14-3-3蛋白抗體，經*（biotin）標記。樣品和*標記人14-3-3蛋白人14-3-3蛋白抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
產品名稱 | 人14-3-3蛋白Elisa Kit |
英文名稱 | Human 14-3-3 Protein ELISA Kit |
規格 | 48T/96T |
試劑準備：
1. 人14-3-3蛋白Elisa Kit使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。
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樣本處理及要求：
1. 人14-3-3蛋白Elisa Kit血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。
仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
公司采用人14-3-3蛋白Elisa Kit的全是進口原材料研，發靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠。
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