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人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1TIMP-1Elisa Kit

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全程ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)（從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過(guò)程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。）

詳細(xì)介紹

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit Human TIMP-1 ELISA Kit
Tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs，TIMP-1基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1。TIMPs的作用機(jī)理，可能是通過(guò)其17～19位上的*—*—異*與MMP的S1′-S2′-S3′區(qū)結(jié)合，與MMP第16位上天冬氨酸殘基的羧基和其活性中心的鋅結(jié)合，從而抑制其活性。TIMPs不僅能與酶的催化位點(diǎn)結(jié)合，使酶失活，還能與酶原的某些位點(diǎn)結(jié)合，阻止酶原活化。調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶的活化及蛋白活性。其家族共有四個(gè)成員：TIMP-1，TIMP-2，TIMP-3，TIMP-4。TIMP-1可由多種細(xì)胞產(chǎn)生，通過(guò)非共價(jià)鍵結(jié)合抑制MMPs的活性。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)*（biotin）標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TIMP-1B顯色。TIMP-1B在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit操作流程示意：
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上海撫生“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit優(yōu)勢(shì)如下：
1）*抗體——高效、靈敏、特異
2）規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3）*的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4）適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5）可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
試劑和樣本的控制方法：
一、人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit試劑
1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。
二、人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解
操作步驟：
1、人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度（O.D. 值）。
10、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
11、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
12、測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
以下是人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）Elisa Kit的詳細(xì)介紹，點(diǎn)擊了解更多Human ELISA Kit。
規(guī)格:96T/48T人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA,α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit *