豬巨細(xì)胞集落刺激因子GM-CSF Elisa KitPorcine GM-CSF ELISA Kit
GM-CSF,由各種細(xì)胞(包括活化T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和纖維母細(xì)胞)對細(xì)胞因子或免疫和炎癥刺激素的響應(yīng)而產(chǎn)生。GM—CSF促使造血細(xì)胞的增殖和成熟;也能增強(qiáng)抗體依賴的細(xì)胞毒活性、細(xì)胞表面受體抗原表達(dá),并刺激細(xì)胞因子分泌;特別是能增強(qiáng)腫瘤殺傷細(xì)胞因子。除了對粒-巨噬祖細(xì)胞,GM-CSF對于紅細(xì)胞, 巨核細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞祖細(xì)胞也是一種生長因子。對成熟的造血細(xì)胞,GM-CSF是粒細(xì)胞、單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞的存活因素并激活它們的效應(yīng)功能。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
產(chǎn)品名稱 | 豬巨細(xì)胞集落刺激因子GM-CSF Elisa Kit |
英文名稱 | Porcine GM-CSF ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑準(zhǔn)備:
1. 豬巨細(xì)胞集落刺激因子GM-CSF Elisa Kit使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
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樣本處理及要求:
1. 豬巨細(xì)胞集落刺激因子GM-CSF Elisa Kit血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司采用豬巨細(xì)胞集落刺激因子GM-CSF Elisa Kit的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
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規(guī)格: 0.5mg*Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
規(guī)格: 0.5mg進(jìn)口/國產(chǎn)EXPB-2 植物延展素-β(抗原)
規(guī)格: 0.5mg現(xiàn)貨供應(yīng)factor VIII 第八因子相關(guān)抗原(多肽片斷抗原)
規(guī)格: 0.5mg*FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1
規(guī)格: 0.5mg進(jìn)口/國產(chǎn)Agrin peptide 聚集蛋白抗原
規(guī)格: 0.5mg現(xiàn)貨供應(yīng)Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原
規(guī)格: 0.5mg*FasL(抗原)
Embigin蛋白(EMB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
Enah/Vasp樣蛋白(EVL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
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