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更新時間:2016-03-23 23:54:02瀏覽次數:344次
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免疫學技術正沿著基礎研究-應用研究-高技術開發研究3條主線在開展,上海撫生生物人胎盤生長因子(多肽抗原)正推動著技術平臺的發展。
人胎盤生長因子(多肽抗原)動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。人胎盤生長因子(多肽抗原)公司產品詳情請參閱有關詳細論述鏈接點擊:Anti-DCP (Des-γ-carboxy-prothrombin)??異常*原/脫-γ-羧基*原抗體Anti-DDC(DOPA decarboxylase)??多巴胺脫羧酶抗體Anti-Defensin β1??防御素β1抗體anti-DEK oncogene (DNA binding)??DEK癌基因結合蛋白Anti-Defensin β2??防御素β2抗體Anti-Deltex-1??DTX1 (Deltex protein 1)Anti-Dengue Virus(Dengue virus type -2)??抗登革熱病毒抗體Anti-Des antibody (Desmin)??結蛋白(抗體)Anti-DFF-45/ICAD (DNA fragmentation factor-45)??DNA裂解因子抗體Anti-Digoxin IgG?(兔抗Dig-RCA)??兔抗地高辛抗體Anti-DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT)??DISC1 C端抗體Anti-DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT)??DISC1 N端抗體anti-DJ-1??絲裂原依賴性癌基因蛋白抗體Anti-DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformα/β)??兔抗DLX4抗體A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存備用,或凍干保存。 (2) 體外培養單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養,又可以進行懸浮培養。雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養瓶中,以含10-15%小牛血清的培養基培養,細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養。單位體積內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。
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