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異常原/脫-γ-羧基原抗體

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異常*原/脫-γ-羧基*原抗體經(jīng)過(guò)*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟，在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。

詳細(xì)介紹

異常*原/脫-γ-羧基*原抗體 動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止，通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法，鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得，因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi)，在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤，并產(chǎn)生腹水，因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，不過(guò)，腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白（包括Ig），因此在很多情況下要提純后才能使用，而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn)，故而用SPF級(jí)小鼠。 異常*原/脫-γ-羧基*原抗體A、材料：a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷（Pristane）或液體石蠟。c. 處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法：a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟，每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后，每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況，如腹部明顯膨大，以手觸摸時(shí)，皮膚有緊張感，即可用16號(hào)針頭采集腹水，一般可連續(xù)采2-3次，通常每只小鼠可采5-10ml腹水；d. 將腹水離心（2000r/min 5分鐘），除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物，收集上清，測(cè)定抗體效價(jià)，分裝，-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀４妗?br />公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊： Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag 小鼠*Ⅷ相關(guān)抗原（FⅧ-Ag）
Mouse Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ 小鼠*Ⅸ（FⅨ）
Mouse coagulation factor Ⅹ,FⅩ 小鼠*Ⅹ（FⅩ）
Mouse von Willebrand Factor,vWF 小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子（vWF）
Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP 小鼠前心鈉肽（Pro-ANP）
Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP 小鼠N端前腦鈉素（NT-proBNP）
Mouse plasmin-antiplasmin complex,PAP 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物（PAP）
Mouse thrombin-antithrombin complex,TAT 小鼠*抗*復(fù)合物（TAT）
Mouse anti-thrombin receptor,ATR 小鼠抗*受體（ATR）
Mouse thrombin receptor,TR 小鼠*受體（TR）
Mouse cardiac troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）
Mouse Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K 小鼠磷酸肌醇3激酶（PI3K）
mouse Beta-Endorphin,β-EP 小鼠β內(nèi)啡肽（β-EP）
Mouse Ischemia Modified Albumin,IMA 小鼠缺血修飾白蛋白（IMA）
Mouse protein kinase B,PKB 小鼠蛋白激酶B（PKB）
（2）體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講，雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞（anchorage dependent cell，ADC），因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng)，又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段，即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中，以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳，然后收集培養(yǎng)上清，其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然，這種方法制備的單抗量極為有限，無(wú)疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗，就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量（高密度）培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多，細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng)，單抗的濃度就越高，產(chǎn)量就越大。 異常*原/脫-γ-羧基*原抗體