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活化復(fù)制因子2抗體

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活化復(fù)制因子2抗體經(jīng)過*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。

詳細(xì)介紹

活化復(fù)制因子2抗體動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級(jí)小鼠。 活化復(fù)制因子2抗體A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號(hào)針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測(cè)定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?span style="color: #ff0000"> (2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。
公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊: Human nitric oxide,NO 人一氧化氮(NO)
Human Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)
Human Vitamin C,VC 人*(VC)
Human Vitamin B6,VB6 人*6(VB6)
Human soluble P-selectin,sP-selectin 人可溶性P選擇素(sP-selectin)
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)
Human Vitamin D,VD 人*(VD)
Human Vitamin K1,VK1 人*1(VK1)
Human Vitamin B12,VB12 人*12(VB12)
Human Vitamin D3,VD3 人*3(VD3)
Human Vitamin D2,VD2 人*2(VD2)
Human Vitamin E,VE E 人*(VE)
Human Vitamin A,VA 人*(VA)
Human Guanine Exchange Factor,GEF 人鳥苷酸交換因子(GEF)
Human Vitamin D Receptor,VD R 人*受體(VD R)
  雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無(wú)疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng),單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。


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