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96T人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒

閱讀:190發布時間:2013-01-11

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  96T人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒使用說明書
  
  本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
  
  檢測范圍:每種的檢測范圍都有所不同,具體請查看說明書
  
  特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的指標,且與其他相關蛋白無交叉反應。
  
  有效期:6個月
  
  預期應用:ELISA法檢測指標血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中含量或靈敏度。
  
  96T人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒使用說明書實驗原理
  
  用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  
  試劑盒組成及試劑配制
  
  1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
  
  2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
  
  3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
  
  4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
  
  需要而未提供的試劑和器材
  
  1.標準規格酶標儀
  
  2.高速離心機
  
  3.電熱恒溫培養箱
  
  4.干凈的試管和Eppendof管
  
  5.系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
  
  6.蒸餾水,容量瓶等
  
  96T人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒使用說明書
  
  標本的采集及保存
  
  1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
  
  標本的稀釋原則:
  
  首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
  
  標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為50U/L,做系列倍比稀釋后,分別稀釋50U/L,25U/L,12.5U/L,6.25U/L,3.12U/L,1.56U/L,0.78U/L,樣品稀釋液直接作為標準濃度0U/L,臨用前15分鐘內配制。
  
  如配制25U/L標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)50U/L的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
  
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