CD45（白細(xì)胞共同抗原）抗體 
 
英文名稱：Anti-CD45（LCA/gp180）

產(chǎn)品編號(hào)：B-02126

產(chǎn)品規(guī)格：0.1ml/0.2ml

抗體的多樣性：
  任何一個(gè)正常人血清中的抗體都是含有成千上萬(wàn)的、多種多樣的、具有各種*型抗原性的免疫球蛋白分子混合物。κ鏈和 λ鏈可以和各類、各亞類配合。重鏈、輕鏈本身又有各種異型，每一克隆產(chǎn)生的Ig又具有自身的*型。
  抗體的多樣性受 B細(xì)胞系統(tǒng)的遺傳基因控制。肽鏈?zhǔn)怯蓛蓚€(gè)不同基因分別編碼可變區(qū)或恒定區(qū)，恒定區(qū)的基因（C基因）是有限的,它雖然可以決定Ig分子的類別和亞類，為造成Ig分子多樣性的原因之一，但是，造成免疫球蛋白分子多樣性的主要原因卻在于可變區(qū)的異質(zhì)性，可變區(qū)是由V基因編碼的，而V基因的數(shù)目仍不清楚。
  對(duì)抗體多樣性的遺傳控制曾提出3種學(xué)說(shuō):①種系學(xué)說(shuō)（又稱胚系學(xué)說(shuō)）：抗體形成細(xì)胞具有編碼Ig分子的全部基因（即有限數(shù)量的C基因和未知數(shù)量的V基因，它是通過(guò)長(zhǎng)期進(jìn)化形成并通過(guò)生殖細(xì)胞從親代傳給子代。又稱胚系學(xué)說(shuō)；②體細(xì)胞突變學(xué)說(shuō)：在生殖細(xì)胞內(nèi)只繼承了數(shù)量有限的V基因，Ig分子多樣性的形成,是由于體細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程中發(fā)生突變或基因重組，從而產(chǎn)生許多不同的 V基因。體細(xì)胞突變可能對(duì)Ig分子的多樣性發(fā)生重要作用;③V區(qū)基因相互作用學(xué)說(shuō)：Ig分子可變區(qū)是由V基因片段、J基因片段和D基因片段組成，V、D、J基因相互連接對(duì)Ig分子多樣性的產(chǎn)生，是極為重要的。Ig的多樣性不可能簡(jiǎn)單地歸因于上述的某一學(xué)說(shuō)，它可能與上述多種機(jī)制有關(guān)，也可能還與基因片段連接點(diǎn)上的連接多樣性以及VL和VH鏈的不同配對(duì)有關(guān)。
單克隆抗體的制備過(guò)程：
1）免疫脾細(xì)胞的制備 制備單克隆抗體的動(dòng)物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備，也可采用脾內(nèi)直接免疫法。
2）骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選 在融合前，骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過(guò)含8-AG的培養(yǎng)基篩選，防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性（恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活）。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，融合前24h換液一次，使骨髓瘤細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
3）細(xì)胞融合的關(guān)鍵: 　　1技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。例如，供者淋巴細(xì)胞沒(méi)有查到免疫應(yīng)答。這必然要失敗的。
2融合試驗(yàn)zui大的失敗原因是污染，融合成功的關(guān)鍵是提供一個(gè)干凈的環(huán)境，以及適宜的無(wú)菌操作技術(shù)。
4）陽(yáng)性克隆的篩選 應(yīng)盡早進(jìn)行。通常在融合后10天作*次檢測(cè)，過(guò)早容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。檢測(cè)方法應(yīng)靈敏、準(zhǔn)確、而且簡(jiǎn)便快速。具體應(yīng)用的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì)，以及所需單克隆抗體的功能進(jìn)行選擇。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法zui簡(jiǎn)便，RIA法zui準(zhǔn)確。陽(yáng)性克隆的篩選應(yīng)進(jìn)行多次，均陽(yáng)性時(shí)才確定為陽(yáng)性克隆進(jìn)行擴(kuò)增。
5）克隆化 克隆化的目的是為了獲得單一細(xì)胞系的群體。克隆化應(yīng)盡早進(jìn)行并反復(fù)篩選。這是因?yàn)槌跗诘碾s交瘤細(xì)胞是不穩(wěn)定的，有丟失染色體的傾向。反復(fù)克隆化后可獲得穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株。
動(dòng)物免疫
細(xì)胞融合
克隆篩選
交雜瘤細(xì)胞的克隆化
腹水制備與單抗純化

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