檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供

產品全稱：P-PKB 檢測試劑盒

英文名稱：P-PKB ELISA kit

產品貨號：A098125

規格：48T/96T

服務：公司產品僅用于科研可提供免費代測服務，以及產品說明書和技術指導等

保存環境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

原纖蛋白3(FBN3)聯免疫吸附測定試劑盒考馬斯亮藍G250庖肉牛肉粒 BRL-精氨鹽鹽 98%

孕激/孕(Pg)聯免疫吸附測定試劑盒考馬斯亮藍G250庖肉培養礎 BRL-精氨鹽鹽 EP, JP, USP 級，≥98.5%,用于培養

孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)聯免疫吸附測定試劑盒考馬斯亮藍G250十六烷三瓊脂 BRL-精氨鹽鹽 99%

孕受體(PGR)聯免疫吸附測定試劑盒 考馬斯亮藍R250蠟樣芽孢桿菌顯色培養 BRL-精氨 98%

可溶性CD44分子(sCD44)聯免疫吸附測定試劑盒考馬斯亮藍R250大腸桿菌O157：H7顯色培養 BRL-氨 99%

早老2(PS2)聯免疫吸附測定試劑盒 考馬斯亮藍R250弧菌顯色培養 BRL-谷氨 99%

早期生長應答蛋白1(EGR1)聯免疫吸附測定試劑盒考馬斯亮藍R250溴化十六烷三銨瓊脂培養（藥典） BRL-谷氨 Ultra pure,≥99.5% (NT)

早期生長應答蛋白2(EGR2)聯免疫吸附測定試劑盒噻唑藍阪崎腸桿菌顯色培養 BR非動物源，EP, JP, USP ；用于培養，98.5 to 101.0%

早期生長應答蛋白3(EGR3)聯免疫吸附測定試劑盒噻唑藍鹽硫乳瓊脂培養（藥典） BRL-組氨鹽鹽，一水 99%

早期生長應答蛋白4(EGR4)聯免疫吸附測定試劑盒噻唑藍葡萄糖肉湯 BR非動物源，EP, JP, USP ；用于培養，98.5 to 101.0%

核轉錄因子Y亞γ(NFYC)聯免疫吸附測定試劑盒噻唑藍氨脫羧試驗培養礎 BRL-組氨鹽鹽，一水 Ultra pure,≥99.5% (AT)

粘蛋白5AC(MUC5AC)聯免疫吸附測定試劑盒曲利苯藍曙紅亞藍瓊脂培養 BRL-異亮氨 99%

粘蛋白5B(MUC5B)聯免疫吸附測定試劑盒曲利苯藍品紅亞硫鈉培養 BRL-亮氨 99%

粘蛋白7(MUC7)聯免疫吸附測定試劑盒曲利苯藍腸道菌增菌肉湯 BRL-賴氨鹽鹽 99%

粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)聯免疫吸附測定試劑盒 曲利苯藍糖發酵培養礎 BRL-賴氨鹽鹽 Ultra pure,≥99.5% (AT)

真核翻譯起始因子3a(eIF3a)聯免疫吸附測定試劑盒  二苯青FF真菌瓊脂培養 BR非動物源，EP, JP, USP ；用于培養，98.5 to 101.0%
P-PKB 檢測試劑盒DTAC；十二烷基三甲基氯化銨呼吸道合胞病核蛋白抗體N-乙酰-DL-亮氨

DTAC；十二烷基三甲基氯化銨核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體N-乙酰-DL-亮氨

十四烷基三甲基(TTAB)RCCD1蛋白抗體N-乙酰-DL-亮氨

十四烷基三甲基(TTAB)磷化周期檢查控制蛋白質抗體L-賴氨

十四烷基三甲基(TTAB)磷化減數分裂重組蛋白家族REC8抗體L-賴氨

十二烷基三甲基ATP依賴解旋RENT1抗體L-賴氨

十二烷基三甲基Ras相關雌激素調節生長抑制蛋白L-賴氨鹽鹽

CTAB；十六烷基三甲基核酮糖1,5二磷