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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR快速檢測試劑盒>>其它法>> 病毒基因組DNA /RNA提取試劑盒48T
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-04-02 12:24:09瀏覽次數(shù):409次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 智慧城市網(wǎng)水生動(dòng)物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒48T
貨號 | FS-02R6712 |
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特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:病毒基因組DNA /RNA提取試劑盒48T 規(guī)格:48T 分類:核酸提取系列(Et) 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 |
試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔) 2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。 3、 樣品稀釋液:1×20ml。 4、 檢測稀釋液A:1×10ml。 5、 檢測稀釋液B:1×10ml。 |
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對照。
十二烷基磺鈉 離子對色譜磷氫鈣 AR,99.0 %幽門螺桿菌IgG抗體檢測試劑盒
3-磺基烯鹽 98%L-乳鈣 USP級蛋白精氨甲基轉(zhuǎn)移1檢測試劑盒
十二烷基磺鈉 AR,90.0% L-乳 85-90%分泌型卷曲相關(guān)蛋白1檢測試劑盒
十二烷基磺鈉 98%L-乳 96%Dickkopf 3檢測試劑盒
1-辛烷磺鈉 用于離子對色譜,99%L-乳 分析標(biāo)準(zhǔn)品CTXIII檢測試劑盒
4,4'-二乙烯二羧 96%L-乳 98%5α-雙氫睪酮 檢測試劑盒
水蘇四糖,四水 98%L-乳鈉 98%性別決定區(qū)Y蛋白檢測試劑盒
1-丁烷磺鈉 98%羧甲基纖維鈉 粘度: 800-1200mpa.s ,USP級腎綜合征出血熱病抗體檢測試劑盒
2,2′:6′,2′′-三吡啶 98%聚氧乙烯EL pH范圍: 6.0-8.0風(fēng)疹病抗體檢測試劑盒
四氫噻唑 98%乳糖,無水 Ph Eur,USP,NF,JP吸血蟲抗體檢測試劑盒
基-三[二甲基硅氧烷]硅烷 98%硬脂鎂 AR,Mg 4.0-5.0%CD34分子檢測試劑盒
烯四酯 98%,含500ppm氫單甲MEHQ穩(wěn)定劑硬脂鎂 USP,EP腫瘤干標(biāo)記物檢測試劑盒
1,2-十四碳二 90%十二烷基硫鈉 Ph. Eur,USP級,92%Parkin蛋白檢測試劑盒
5--1.3.3-基-2-亞甲基吲哚啉 98%葡聚糖10 分子量10000維生B檢測試劑盒
三辛 離子對試劑葡聚糖70 分子量 70000金葡萄球菌腸B檢測試劑盒
病毒基因組DNA /RNA提取試劑盒48T蘇丹Ⅱ2-溴-9-芴酮FAM55D蛋白抗體
7B2-溴-9-芴酮組織激活過氧化活化增生受體γ蛋白抗體
1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亞2-溴-9-芴酮FAM21C蛋白抗體
多聚磷鈉2-氨基-9-芴酮FAM13C1蛋白抗體
肉豆蔻異丙酯2-氨基-9-芴酮FAM59B蛋白抗體
氧化鋁氧化銥(IV) 水合物FAM59A蛋白抗體
馬錢N,N--1,1,2,3,3,3-六FAM160B1蛋白抗體
牛膝N,N-二基-1,1,2,3,3,3-六FAM161B蛋白抗體
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