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貨號 | FS-01S63384 |
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產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
植物銨態氮檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63384 |
商品介紹:
測定意義
氮素是構成生物體的一種必需元素,自然界中的氮素循環包括許多轉化作用。空氣中的氮氣被固氮微生物及植物與微生物的共生體固定成氨態氮,經過硝化微生物的作用轉化成硝態氮,后者被植物或微生物同化成有機氮化物,植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。
測定原理
銨態氮在強堿性介質中與次氯酸鹽和苯作用,生成水溶性染料靛酚藍,在625nm處有特征吸收峰,吸光值與銨態氮含量成正比。
自備實驗用品及儀器
天平、常溫離心機、酶標儀、96孔板、蒸餾水。
產品內容:
公司產品僅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
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植物銨態氮檢測試劑盒微量法油甲酯 96%BOC-D-3-(2-吡基)- 99%CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉化生長因子β受體抗原
油甲酯 Standard for GC,≥99%(GC)FMOC-D-4-溴 95%CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原
異抗壞血鈉 98%L-烯基甘 95%CD146/MCAM 黑色瘤粘附分子CD146抗原
4-(2-乙基)磺酰 99%三氟甲磺鈉 98%ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 肽N抗原
4-乙酰吡 98%三氟磺銀(Ⅰ) 97%CD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內受體抗原
3-基-4-基吡唑 99%三氟磺釤 98%CD28 CD28抗原
3-基-4-甲酰基吡唑半硫鹽 98%三銀 98%CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白粘附分子抗原
3-乙酰吡 98%三氟甲磺鋱 98%CD177/NB1 peptide 嗜中性粒抗原CD177抗原
注意事項:
1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應當乘以稀釋倍數。
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