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細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。國內資深的細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。下面細胞株培養技術的幾大要點：
一、取材
細胞株培養的材料主要來源于外科手術或活檢瘤組織，取材時避免用壞死組織，要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位，瘤性轉移淋巴結或胸腹水是較好的培養材料。取材后盡快培養，因故不能立即培養者，可凍存。細胞株的培養方法及凍存方法同前述正常組織。
二、成纖維細胞排除
在細胞株培養中常混雜有一些成纖維細胞，培養時能與瘤細胞同時生長，并常壓過癌細胞，導致癌細胞生長受阻以至消失，應仔細排除。排除方法常有：機械刮除法、反復貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。
三、提高細胞培養存活率和生長率
根據實驗經驗，細胞株要經過對新環境的適應才能生長，因此不能局限于一般培養法，須采用一些特殊措施。如：用適宜底物，鼠尾膠原底層及飼細胞底層等。用細胞生長因子，根據細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子，如胰島素，雌激素等。也可以考慮動物媒介培養。
總之，在細胞株待轉化細胞數量明顯上升，并出現細胞團塊后，可轉入細胞培養瓶中，加培養基，常溫培養半個月，一般每隔一周觀察一次，決定是否換液、傳代，靠譜的細胞株的每個步驟都至關重要。細胞生長達一定數量后凍存，凍存前應進行核型分析和存檔。
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